皮膚刺激試驗

皮膚刺激是指皮膚接觸受試物后產生的可逆性炎性癥狀。

試驗方法的原則

受試物應以一次劑量或多次劑量涂(敷)于健康的無破損的皮膚上。每種

受試物至少要用4只健康成年動物。uu011

試驗方法

急性皮膚刺激試驗(一次皮膚涂抹實驗)

1 試驗前24小時，將實驗動物背部脊柱兩側毛剪掉，不可損傷表皮,去毛范圍左、右各約3cmX 6cm。

2 取受試物0.1ml (g)滴在2. 5cmX2.5cm大小的四層紗布上敷貼在一側皮膚上，或直接將受試物涂在皮膚上，然后用一層油紙覆蓋，再用無刺激性膠布和繃帶加以固定。另一側涂賦形劑作為對照。敷用時間一般為24小時，亦可一次敷用4小時。試驗結束后用溫水或無刺激性溶劑除去殘留受試物。

3 于除去受試物后1、24和48小時觀察涂抹部位皮膚反應，按表1和表2進行皮膚反應積分和刺激強度評價。

多次皮膚刺激試驗

1 先將實驗動物背部脊柱兩側皮膚的毛剪掉或剃掉，去毛范圍各為2.5cmX 2.5cm。

2 取受試物0. 1~0.5ml (g)涂抹在一側皮膚毛，另一側涂賦形劑作為對照，每天涂抹1~2次，連續(xù)涂抹14天每次涂藥前應剪毛，不得損傷皮膚保證受試物與皮膚充分接觸。

3 每天觀察皮膚反應，按表1評分。脫悄積分為1。最高刺激指數(shù)為14(觀察次數(shù)) X8(總積分數(shù))=112。

眼刺激試驗

眼刺激性是指眼表面接觸受試物后產生的可逆性炎性變化。

1 試驗方法的原則

• 受試物應以一次劑量或多次劑量滴入(涂入)或噴灑眼內。
• 每種受試動物的眼睛應保證無任何炎性反應和眼損傷。
• 每組試驗動物數(shù)至少4只，采用自身對照，首選動物為家兔。
• 受試物使用濃度一般用原液或用適當無刺激性賦形劑配制的50%軟膏或其他劑型。
• 已證明有皮膚刺激性的物質，不必進行本項試驗。

2 試驗方法

一次眼刺激試驗

• 將液態(tài)或軟膏(0. 1ml或100mg)受試物滴入(涂入)實驗動物一側結膜囊內，另一側眼作為對照。滴藥后使眼被動閉合5~10s，記錄滴藥后6、24、48和72小時眼的局部反應，第4、7天觀察恢復情況。觀察時應用熒光素鈉檢查角膜損害，最好用裂隙燈檢查角膜透明度、虹膜紋理改變。
• 如果受試物明顯引起眼刺激反應，可再選用6只動物，將受試物滴入一側結膜囊內，接觸4s或30s后用生理鹽水沖洗干凈，冉觀察眼的刺激反應。
• 按表4所列眼損害分級標準積分，再按表5進行眼刺激強度的評價。

多次性眼刺激試驗

將受試物原液0.1ml或配制成的50%軟膏約100mg 滴入或涂入一側結膜囊內，另一側眼作為對照，每日次，連續(xù)14天。實驗結束后，繼續(xù)觀察7~14天，按表4分級標準記錄眼的刺激反應，并按表5眼刺激性評價標準進行眼刺激強度的評價。

結果評價

按上述分級評價標準評定，如一次或多次接觸受試物，不引起角膜、虹膜和結膜的炎癥變化，或雖引起輕度反應，但這種改變是可逆的，則認為該受試物可以安全使用。

在許多情況下，哺乳動物眼的反應較人敏感，從動物試驗結果外推到人可提供較有價值的依據(jù)。