材料及方法

1、試驗(yàn)材料

1.1、受試物

隨機(jī)抽取市場(chǎng)上皮膚黏膜消毒劑包括含季銨鹽類(lèi)的女性洗液和含醋酸氯己定及碘伏類(lèi)皮膚消毒液共35種；還抽取一次性衛(wèi)生用品包括衛(wèi)生巾和安全套共37種。衛(wèi)生用品試驗(yàn)時(shí)將3g受試物剪成碎片，浸泡于30ml滅菌生理鹽水中，攪拌后密封于容器中，置于37℃溫箱中24h取浸泡液備用。

生巾和安全套共37種。衛(wèi)生用品試驗(yàn)時(shí)將3g受試物剪成碎片，浸泡于30ml滅菌生理鹽水中，攪拌后密封于容器中，置于37℃溫箱中24h取浸泡液備用。

1.2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選擇體重20~25kg健康雌性新西蘭種家兔，每種受試物用6只，由北京通利實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供，動(dòng)物合格證號(hào)為京動(dòng)許字(2000)第024號(hào)；另取體重200~260gWistar種雌性大鼠，每種受試物用18只，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物合格證號(hào)為京動(dòng)許字9900L。

2、方法

2.1、家兔陰道黏膜刺激試驗(yàn)

將6只家兔隨機(jī)分為受試物組和陰性對(duì)照組，每組3只。將受試物2ml用導(dǎo)尿管注入陰道內(nèi)4~5cm處，陰性對(duì)照組注入等量滅菌生理鹽水。染毒24h后采用氣栓法處死動(dòng)物，剖腹取出完整陰道，縱向切開(kāi)，肉眼觀察病變。取組織用福爾馬林液固定，進(jìn)行常規(guī)病理制片﹑染色、鏡檢。對(duì)家兔陰道黏膜的刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分及刺激強(qiáng)度分級(jí)。

2.2、大鼠陰道黏膜刺激試驗(yàn)

將18只大鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、賦形劑對(duì)照組和受試物組，每組6只。受試物組用適當(dāng)大小的滅菌棉條浸受試物浸泡液，賦形劑對(duì)照組浸以滅菌生理鹽水，分別置于動(dòng)物陰道內(nèi)，陰性對(duì)照組不處理。與陰道黏膜接觸4h24h后頸椎脫臼處死動(dòng)物取出局部陰道組織，肉眼觀察病變，對(duì)大鼠陰道黏膜的刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分及刺激強(qiáng)度分級(jí)。

2.3、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

肉眼觀察，積分為零者為無(wú)陽(yáng)性反應(yīng)；有積分者均為陽(yáng)性反應(yīng)。病理組織學(xué)檢查，各種病變類(lèi)型積分零者為無(wú)病變；有積分者均為有病變。

結(jié)果

1.1、兩種動(dòng)物陰道黏膜剌激試驗(yàn)結(jié)果比較

結(jié)果表明，黏膜消毒劑對(duì)家兔與大鼠陰道黏膜刺激試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)檢出率分別為563%和15.8%(表1)，經(jīng)檢驗(yàn)，二者在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異有顯著性(P<005)。陽(yáng)性反應(yīng)受試物包括11種植物提取物，8種中藥類(lèi)消毒劑，5種狐類(lèi)消毒劑，3種含碘消毒劑，3種含氯消毒劑，1種季銨鹽類(lèi)消毒劑，1種醇類(lèi)消毒劑。一次性衛(wèi)生用品陰道黏膜刺激試驗(yàn)檢出率，兩種動(dòng)物均為0。

結(jié)果表明，黏膜消毒劑對(duì)兩種動(dòng)物陰道黏膜刺激反應(yīng)強(qiáng)度主要為無(wú)刺激性和極輕刺激性；一次性衛(wèi)生用品對(duì)家兔或大鼠陰道黏膜刺激強(qiáng)度分級(jí)均為無(wú)刺激性(表2)光鏡陰道黏膜組織病理檢查病理。

改變檢出率較高，40種產(chǎn)品中僅1種未見(jiàn)病理改變，積分為0有97.5%檢出病理改變(表略)。黏膜消毒劑對(duì)家兔陰道黏膜為極輕刺激性結(jié)果占37.5%，與大鼠比較差異具有顯著性。

1.2、家兔陰道黏膜刺激試驗(yàn)各種病變類(lèi)型比較

病理檢查結(jié)果證明，受試物引起動(dòng)物陰道黏膜病理變化頻率從多到少依次為水腫、充血、白細(xì)胞浸潤(rùn)和上皮組織病變。受試物對(duì)陰道黏膜刺激主要表現(xiàn)為黏膜下水腫和血管擴(kuò)張，并充滿大量紅細(xì)胞，少部分受試物引起嗜中性白細(xì)胞極少至中度浸潤(rùn)，個(gè)別受試物引起黏膜上皮節(jié)段性增生，未見(jiàn)陰道上皮組織出現(xiàn)細(xì)胞壞死改變(表3)。

引起動(dòng)物陰道組織病理改變的皮膚黏膜消毒劑有：中藥類(lèi)5種，肌類(lèi)消毒劑5種，植物提取物4種，季銨鹽類(lèi)1種，含碘消毒劑1種。發(fā)生充血、水腫、炎細(xì)胞浸潤(rùn)及正常陰道組織。

討論

黏膜消毒劑和一次性衛(wèi)生用品均為婦女常用的.衛(wèi)生用品，因其產(chǎn)品成分、工藝及衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)的不同，存在質(zhì)量差異，可能對(duì)黏膜產(chǎn)生某些不良反應(yīng)。本研究通過(guò)對(duì)黏膜消毒劑和一次性衛(wèi)生用品對(duì)大鼠和家兔陰道黏膜刺激試驗(yàn)結(jié)果的比較分析發(fā)現(xiàn)，大鼠和家兔陰道黏膜肉眼觀察陽(yáng)性率分別為158%和563%，黏膜消毒劑陽(yáng)性反應(yīng)率明顯高于衛(wèi)生用品；結(jié)果提示家兔陰道黏膜對(duì)外界刺激反應(yīng)可能較為敏感。

黏膜消毒劑對(duì)動(dòng)物陰道黏膜刺激強(qiáng)度分級(jí)顯示，大鼠全部為無(wú)刺激性；家兔對(duì)于黏膜消毒劑敏感性較高，輕度刺激反應(yīng)率為37.5%；對(duì)相同的黏膜消毒劑反應(yīng)性大鼠明顯低于家兔，這在試驗(yàn)動(dòng)物選擇上存在重大差異。部分動(dòng)物陰道黏膜可見(jiàn)較明顯充血、水腫，黏膜消毒劑肉眼觀察病變檢出率明顯高于一次性衛(wèi)生用品，該結(jié)果與劉順軍等3報(bào)道基本一致。

家兔陰道黏膜病變類(lèi)型主要以黏膜下水腫和血管充血為主，部分動(dòng)物伴有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，未見(jiàn)黏膜上皮組織壞死。2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》)中規(guī)定用家兔進(jìn)行陰道黏膜刺激試驗(yàn)方法，且增加了病理組織學(xué)檢查內(nèi)容，明顯提高了病變檢出率，能較客觀地反映受試物對(duì)組織損傷的程度及類(lèi)型。說(shuō)明細(xì)胞水平病理組織學(xué)檢查對(duì)評(píng)價(jià)受試物黏膜刺激毒性較為敏感。

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