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主營(yíng)產(chǎn)品: 科研試劑, elisa試劑盒, 染色液, 抗體試劑, 免疫學(xué)檢測(cè)服務(wù), 特殊染色服務(wù), 核酸檢測(cè)服務(wù), 生化測(cè)定服務(wù), ELISA試劑盒定制化服務(wù), 抗體定制化服務(wù), 緩沖液定制化服務(wù)
普利萊-甘油三酯酶法測(cè)定試劑盒(血清-培養(yǎng)基)E1003
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¥680.00
≥125
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液體樣本甘油三酯酶法測(cè)定試劑盒 E1003
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
E1003-125 | 液體樣本甘油三酯(TG)酶法測(cè)定試劑盒 | 125次 | 680 |
E1003-250 | 液體樣本甘油三酯(TG)酶法測(cè)定試劑盒 | 250次 | 980 |
描述:甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,也是機(jī)體重要的供能物質(zhì)。高甘油三酯和高膽固醇血癥是臨床常見(jiàn)的高脂血癥,與許多疾病相關(guān)。本試劑盒應(yīng)用甘油磷酸氧化酶法與經(jīng)典的 GPO Trinder 酶學(xué)反應(yīng)原理可以對(duì)血液和食品飲料中的甘油三酯含量進(jìn)行測(cè)定,符合世界衛(wèi)生組織(WHO)、美國(guó) FDA、中國(guó)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》規(guī)定的甘油三酯臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),靈敏度高,
檢測(cè)范圍為 20-2000μmol/L。
原理:(1)脂肪酶分解血清中的甘油三酯為甘油;(2)甘油激酶將甘油磷酸化為 3-磷酸甘油;(3)
3-磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過(guò)氧化氫;在過(guò)氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。
適用范圍:測(cè)定血液、食品飲料中甘油三酯的含量。
組成 :(250 次)
(1) R1 試劑 40 ml
(2) R2 試劑 10 ml
(3) 4 mmol/L 甘油標(biāo)準(zhǔn)品 1 ml
4 oC,儲(chǔ)存 6 個(gè)月。
所需設(shè)備:酶標(biāo)儀、生化分析儀或 721、722 型可見(jiàn)光分光光度計(jì)。最佳工作波長(zhǎng) 550nm,如無(wú)此波長(zhǎng)建議優(yōu)先選用 570nm、次選 530、490nm。
操作步驟:
一 樣本處理:
1. 飲品、清澈液體樣本:可直接進(jìn)行測(cè)定,如超過(guò)線(xiàn)性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
2. 血液:新鮮血液 4oC, 2000 g 離心 5 min 得到血漿,非抗凝血 4oC 放置 2 小時(shí)得到血清后才能用于甘油三酯的測(cè)定。如超過(guò)線(xiàn)性范圍用生理鹽水 1:1~1:5 稀釋后測(cè)定,然后根據(jù)稀釋倍數(shù)計(jì)算濃度。
二 工作溶液配制:按 4:1 比例,取 4 ml 試劑 R1 與 1 ml 試劑 R2 混合即可,立即使用或 4oC 保存 <1 天,變色棄去。
三 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)?/span>用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩
沖液一致的液體,將 4 mM 甘油標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋為 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、 7.8125 μmol/L,通常取其中 4~6 管即可,注意
設(shè)置 0 濃度對(duì)照反應(yīng)管。
四 甘油三酯濃度測(cè)定:
1. 參見(jiàn)下表進(jìn)行加樣。允許稍微增加或減少樣品的加入量,并同時(shí)調(diào)整工作液體積。
2. 37oC 或 25oC 反應(yīng) 15 分鐘。反應(yīng)平衡后顏色在 60 分鐘內(nèi)穩(wěn)定。
3. 先用蒸餾水+工作液的空白管調(diào)零,然后測(cè)定各管OD值。
4. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)并計(jì)算甘油濃度。
附 Excel 作圖步驟:各標(biāo)準(zhǔn)管 OD 值為 y 軸,標(biāo)準(zhǔn)品濃度為 x 軸。(1)鼠標(biāo)左鍵圈住數(shù)據(jù),點(diǎn)擊做圖向?qū)?,選擇-散點(diǎn)圖-,點(diǎn)擊-完成-。(2)
鼠標(biāo)右鍵點(diǎn)圖上的某一點(diǎn),點(diǎn)擊-添加趨勢(shì)線(xiàn)-,點(diǎn)擊-選項(xiàng)-,點(diǎn)擊-顯示公式-和-R2 值-。
加樣比例(檢測(cè)范圍 20-2000μmol/L)
(可對(duì)樣品和工作液比例進(jìn)行微量調(diào)整)
| 96 | 孔微板測(cè)定 | 1 ml 比色杯測(cè)定 | ||||
| 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 樣品 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 樣品 | |
| | | | | | | |
蒸餾水 μl | 10 |
|
|
| 35 |
|
|
標(biāo)準(zhǔn)品 μl |
|
| 10 |
|
| 35 |
|
樣品 μl |
|
|
| 10 |
|
| 35 |
工作液 μl | 190 |
| 190 | 190 | 665 | 665 | 665 |
注:進(jìn)行微板測(cè)定時(shí)標(biāo)準(zhǔn)品的體積可調(diào)整范圍 10-100μl,使用分光光度計(jì)測(cè)定時(shí)標(biāo)準(zhǔn)品的體積也可隨之進(jìn)行調(diào)整。
說(shuō)明:
1. 在中國(guó)一般而言,正常人血清中甘油三酯含量范圍為0.56-1.7mmol/L(62-150mg/dl),血清中甘油濃度約為0.11mmol/L (10mg/dl).
2. 維生 素C>0.18g/L、血紅蛋白>2g/L、膽紅素>0.25g/L、
強(qiáng)還原劑二硫蘇糖醇、巰基乙醇等會(huì)干擾測(cè)。肝素和EDTA在抗凝時(shí)的用量不會(huì)干擾測(cè)定。
3. 樣本即使保存在-20oC的環(huán)境下,甘油三酯也會(huì)自發(fā)水解。因此建議樣品4oC保存時(shí)間應(yīng)短于24小時(shí),當(dāng)-70oC保存是,也應(yīng)不超過(guò)1個(gè)月。
4. 如果室溫較低,應(yīng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間或在37oC進(jìn)行反應(yīng)。
5. 如果要測(cè)定組織細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的含量,請(qǐng)選擇使用E1013,組織細(xì)胞甘油三酯酶法測(cè)定試劑盒。
參考文獻(xiàn):
1. Trinder, P. (1969). Ann. Clin. Biochem. 6: 24 – 27.
2. Barham D and Trinder P. (1972). Analyst 97: 142 –
145