草甘膦，又稱農(nóng)達(dá)，是一種廣譜滅生性除草劑，廣泛應(yīng)用于茶園、果園、玉米田間等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。隨著草甘膦的廣泛使用，其在茶葉、水果、玉米等植物源食品中殘留量的檢測(cè)越來越受到國內(nèi)外的關(guān)注。

茶葉中草甘膦及其代謝物的測(cè)定

SPE-UPLC-MS/MS法

1、范圍

本方法適用于綠茶、花茶、鐵觀音、紅茶和普洱茶中ān甲基lin酸和草甘膦的檢測(cè)，定量限0.1mg/kg。

2、標(biāo)準(zhǔn)溶液

單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取各標(biāo)準(zhǔn)品，用水配制成1000 ug/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)中間液：分別吸取各單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用水配制成1.0 ug/mL、10 ug/mL和50 ug/mL的混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)中間液。

3、提取 

取1 g茶葉于50 mL離心管中，準(zhǔn)確加入10 mL水、10 mL二lǜ甲wán，振蕩10 min，超聲10 min，8000 rpm離心5 min，取5 mL上清液，待凈化。

4、凈化 草甘膦專用柱

依次加入5 mL甲chun、5 mL水，進(jìn)行活化；將待凈化液加入柱中，棄去前3 mL流出液，收集后2 mL流出液，混勻，濾液過0.22 um尼龍濾膜，上機(jī)分析。

注：同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

5、測(cè)定

5.1 UPLC 條件：

色譜柱：Polyamino HILIC，150×2.0 mm，5 μm

流  速：0.2 mL/min     進(jìn)樣量：10 μL      柱  溫：35 ℃

流動(dòng)相： A：乙腈   B：5 mM乙酸銨溶液，ān水調(diào)節(jié)至pH=11

梯度設(shè)置：

Time（min）	0	2	2.1	8	8.1	15
A（%）	80	80	20	20	80	80
B（%）	20	20	80	80	20	20

5.2 質(zhì)譜條件：

電離模式：ESI            掃描方式：負(fù)離子掃描

檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)     電噴霧電壓：-4500 V

霧化氣壓力：60 psi       輔助氣壓力：60 psi

氣簾氣壓力：35 psi       離子源溫度：550 ℃

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

目標(biāo)化合物	定性離子對(duì)（m/z） (母離子/子離子)	定量離子對(duì)（m/z） (母離子/子離子)	碰撞氣能量/eV	去簇電壓/V
ān甲基lín酸	109.9/62.8	109.9/62.8	-23	-53
	109.9/78.9		-35	-51
草甘膦	167.8/62.8	167.8/62.8	-30	-50
	167.8/81.0		-21	-31

6、回收率

茶葉中ān甲基lin酸和草甘膦的LC-MS/MS檢測(cè)添加回收結(jié)果：

樣品 基質(zhì)	回收率（%）
	添加水平：0.1 mg/kg		添加水平：1 mg/kg		添加水平：5 mg/kg
	加標(biāo)量：1.0 ug/mL，加100 uL		加標(biāo)量：10 ug/mL，加100 uL		加標(biāo)量：50 ug/mL，加100 uL
	ān甲基lín酸	草甘膦	ān甲基lín酸	草甘膦	ān甲基lín酸	草甘膦
綠茶	101	92	93	99	95	96
花茶	96	195	99	88	94	98
鐵觀音	88	85	93	97	85	90
紅茶	90	91	88	88	82	93
普洱茶	88	91	86	92	86	97

譜圖（略）