描述：尿素是體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝的含氮終產(chǎn)物，構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白氮。尿素產(chǎn)生于肝臟，經(jīng)腎臟排泄至尿中，其含量取決于蛋白質(zhì)攝入量，蛋白質(zhì)分解代謝和腎功能。血清（漿）中尿素測(cè)定是臨床中反映腎小球?yàn)V過(guò)功能的常用指標(biāo)。試劑盒采用二乙酰肟顯色法，操作簡(jiǎn)單，特異性強(qiáng)，重復(fù)性佳，線(xiàn)性范圍0.03-14mmol/L。

原理: 根據(jù)Fearon反應(yīng)，在強(qiáng)酸性和加熱條件下，尿素與二乙酰一肟縮合生成紅色的二嗪衍生物，在540nm處有最大吸收峰，光密度值在一定范圍內(nèi)與尿素含量成正比。

適用：血清、血漿 、尿液

組成：（微孔測(cè)定300個(gè)樣本，1cm比色杯100個(gè)樣本）

R1試劑50ml

R2試劑5ml

16mM尿素標(biāo)準(zhǔn)品  0.5ml

以上組分4℃保存， 12個(gè)月有效

所需設(shè)備：酶標(biāo)儀、721、722型可見(jiàn)光分光光度計(jì)。最佳工作波長(zhǎng)540nm，如無(wú)此波長(zhǎng)建議選用520nm。

操作步驟：

一、工作液配制：將R1試劑與R2試劑按10:1的比例混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。

二、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)?/strong>將16mM標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水倍比稀釋為8、4、2、1、0.5、0.25、0.125mM通常取8、4、2、1、0.5mM五個(gè)點(diǎn)即可，注意設(shè)置0濃度空白對(duì)照。

三、尿素濃度測(cè)定

（1）參照下表加樣，充分混勻（可按比例調(diào)整整體上樣量）。

尿液樣本建議稀釋1：10—1:50倍，若超出線(xiàn)性范圍，需再稀釋。

（2）請(qǐng)使用耐高溫管于100°C沸水浴或金屬浴中孵育15min。立即冷水冷卻5min。反應(yīng)平衡后，30min內(nèi)顏色穩(wěn)定。

（3）使用酶標(biāo)儀或可見(jiàn)光分光光度計(jì)，540nm空白管調(diào)零后，進(jìn)行測(cè)定。

（4）以O(shè)D值為y軸，尿素濃度為x繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)并計(jì)算尿素濃度。

說(shuō)明：

（1）       目前實(shí)驗(yàn)研究中，已基本采用直接測(cè)定尿素濃度反應(yīng)腎臟濾過(guò)功能，試劑盒測(cè)定的數(shù)值即為尿素濃度，單位為mmol/L。

（2）       正常血清尿素濃度參考值2.86~8.20 mmol/L。

（3）       尿素氮是指尿素分子氨基中的N含量（blood urea nitrogen, BUN），檢測(cè)結(jié)果多用mg/dl為單位，尿素和尿素氮換算公式：

尿素mg/dL*0.1665=尿素mmol/L

尿素mg/dL *(28.02/60.60)=BUN mg/dL

（4）試劑盒僅限于科研，操作時(shí)請(qǐng)佩戴手套。