上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售新城疫病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類齊全，且具有優(yōu)勢價(jià)格，歡迎新老客戶咨詢認(rèn)購。

產(chǎn)品詳細(xì)信息

名稱：新城疫病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒

規(guī)格： 20T/50T

品牌：上海滬崢

【用途】 用于新城疫病毒病的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查

【操作步驟】1.RNA提取 (1) 取疑似新城疫病毒病的病料（取肺、脾、腦等組織等拭子取呼吸道分泌物）1~4g于無菌研缽，研磨并用PBS液（pH7.2~7.4）稀釋成1：4乳劑，分裝1.5ml滅菌EP管，復(fù)凍融2~3次，8000r/min離心5分鐘。（病毒培養(yǎng)液或含呼吸道分泌物的液體，只需凍融1次即可8000r/min離心5分鐘）

（2）取200uL上清液（或標(biāo)準(zhǔn)品Ｔ），移入新的1.5mL滅菌EP管中，加入200uLSR-I，漩渦振蕩混合均勻，靜置5min。

（3）加75uL TU-1，漩渦振蕩混合均勻，10000r/min離心5 min。

（4）將上清轉(zhuǎn)移到新的2 ml離心管（試劑盒內(nèi)提供）中，加入300 uL 異丙醇（1%冰乙酸），上下倒置6-8次，混合均勻。

（5）將步驟4中的混合液移入制備管中，并將制備管置于同一2 ml離心管，10000 r/min離心1min。

（6）棄濾液，將制備管置回到2 ml離心管中，加500 uL SR-II，室溫靜置1min，10000 r/min離心1 min。

（7）棄濾液，將制備管置回到2 ml離心管中，加700 uL SR-Ⅲ，10000 r/min離心1 min。

（8）將制備管置回到2 ml離心管中，10000 r/min離心1 min。

（9） 將制備管置于潔凈的1.5 ml離心管中（試劑盒內(nèi)提供），在制備管膜中央加40 uL TU-2， 室溫靜置1 min。10000 r/min離心1 min洗脫。洗脫液即為模板，即用或-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

3 .PCR操作 

4.電泳

配制1%瓊脂糖凝膠，取PCR產(chǎn)物5uL混合1uL TU-8，加樣于凝膠孔中，同時(shí)在相鄰孔加3uLTU-7，在120v 電壓下，1×TAE液中電泳15分鐘，在紫外成像儀下觀察結(jié)果。

【結(jié)果判定】

    在約710bp位置出現(xiàn)擴(kuò)增帶，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽性

新城疫病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒

【注意事項(xiàng)】

1. 每次使用，開蓋之前請先瞬時(shí)離心，使試劑沉于管底。

2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫?cái)R置太久。

3. 盡量建立PCR試驗(yàn)操作區(qū)，避免交叉污染。

4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，由于操作失誤、移液器不精確、定時(shí)不準(zhǔn)確造成無結(jié)果情況，不予負(fù)責(zé)。

5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁，可用鑷子夾取。

6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。

血清學(xué)診斷技術(shù)

 血清學(xué)診斷技術(shù)是建立在抗原與相應(yīng)抗體在體外發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)基礎(chǔ)上的檢測技術(shù)，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和提高，血清學(xué)抗體檢測新技術(shù)層出不窮，應(yīng)用面也日益擴(kuò)大。如病毒中和試驗(yàn)、血凝和血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)、血清平板和試管凝集試驗(yàn)、免疫膠體金層析技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等，這些試驗(yàn)方法已被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室熟練掌握應(yīng)用。如布病采用平板或試管凝集試驗(yàn)，禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制試驗(yàn)，豬瘟和口蹄疫采用間接血凝試驗(yàn)；采用 ELISA 試驗(yàn)檢測禽流感、豬瘟、口蹄疫等疫病，養(yǎng)殖場也可采用血凝試驗(yàn)和免疫金標(biāo)技術(shù)來檢測免疫抗體滴度，操作簡便快速，使抗體監(jiān)測技術(shù)真正得以推廣 , 切實(shí)為動(dòng)物疫病防控提供有力的幫助。