上海滬崢生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品, PCR檢測(cè)試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
禽呼腸孤病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒
價(jià)格
訂貨量(盒)
¥2600.00
≥1
店鋪主推品 熱銷潛力款
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上海滬崢生物科技有限公司
店齡6年 企業(yè)認(rèn)證
聯(lián)系人
李小姐
聯(lián)系電話
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經(jīng)營模式
生產(chǎn)商,貿(mào)易商,
所在地區(qū)
上海市奉賢區(qū)
- 基本信息
- 用途范圍:科研
- 產(chǎn)地:國產(chǎn)
- 品牌:上海滬崢
- 規(guī)格:50T
- 貨號(hào):HZ-75249
- 是否進(jìn)口:否
上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售禽呼腸孤病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨,我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類齊全,且具有優(yōu)勢(shì)價(jià)格,歡迎新老客戶咨詢認(rèn)購。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
名稱:禽呼腸孤病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒
規(guī)格: 20T/50T
品牌:上海滬崢
【用途】 用于禽呼腸孤病毒的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
【操作步驟】
1.RNA提取
(1) 取疑似病料(關(guān)節(jié)組織、雞胚尿囊液等)1~4g于無菌研缽,研磨并用PBS液(pH7.2~7.4)稀釋成1:4乳劑,分裝1.5ml滅菌EP管,反復(fù)凍融2~3次,8000r/min離心5分鐘。(病毒培養(yǎng)液,只需凍融1次即可8000r/min離心5分鐘)
(2)取200uL上清液(或標(biāo)準(zhǔn)品T),移入新的1.5mL滅菌EP管中,加入200uLSR-I,漩渦振蕩混合均勻,靜置5min。
(3)加75uL TU-1,漩渦振蕩混合均勻,10000r/min離心5 min。
(4)將上清轉(zhuǎn)移到新的2 ml離心管(試劑盒內(nèi)提供)中,加入300 uL 異丙醇(1%冰乙酸),上下倒置6-8次,混合均勻。
(5)將步驟4中的混合液移入制備管中,并將制備管置于同一2 ml離心管,10000 r/min離心1min。
(6)棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,加500 uL SR-II,室溫靜置1min,10000 r/min離心1 min。
(7)棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,加700 uL SR-Ⅲ,10000 r/min離心1 min。
(8)將制備管置回到2 ml離心管中,10000 r/min離心1 min。
(9) 將制備管置于潔凈的1.5 ml離心管中(試劑盒內(nèi)提供),在制備管膜中央加40 uL TU-2, 室溫靜置1 min。10000 r/min離心1 min洗脫。洗脫液即為模板,即用或-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>
3 .PCR操作
4.電泳
配制1%瓊脂糖凝膠,取PCR產(chǎn)物5uL混合1uL TU-8,加樣于凝膠孔中,同時(shí)在相鄰孔加3uLTU-7,在120v 電壓下,1×TAE液中電泳15分鐘,在紫外成像儀下觀察結(jié)果。
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【結(jié)果判定】如果為禽呼腸孤病毒感染陽性,則有約297bp目的條帶,如果為禽呼腸孤病毒感染陰性,則無目的條帶。
1. 陰性對(duì)照;
2. 陽性擴(kuò)增;
3. DL2000
【注意事項(xiàng)】
1. 每次使用,開蓋之前請(qǐng)先瞬時(shí)離心,使試劑沉于管底。
2. 所有試劑在要求溫度下保存,-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融,使用后的試劑立即放回,避免在室溫?cái)R置太久。
3. 盡量建立PCR試驗(yàn)操作區(qū),避免交叉污染。
4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,由于操作失誤、移液器不精確、定時(shí)不準(zhǔn)確造成無結(jié)果情況,不予負(fù)責(zé)。
5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前,要高壓滅菌,操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁,可用鑷子夾取。
6. 注意防止試劑污染,在有效期限前用完。
1. 將qPCR試劑盒解凍,理想溫度為5℃(±3℃),置于冷凍架上。在室溫21℃(±5℃)下解凍,但必須在解凍后立即使用。
2. 準(zhǔn)備qPCR預(yù)混料(PCR管)。
3. 在qPCR預(yù)混料(PCR管)中分別加入以下物質(zhì):
①5μl陰性質(zhì)控(DW);②5μl樣本提取的DNA;③5μl陽性質(zhì)控DNA (PC)。
4. 輕輕混合,離心片刻。
5. 用PCR儀對(duì)樣品進(jìn)行PCR反應(yīng)。