上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售雞傳染性喉氣管炎病毒PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類齊全，且具有優(yōu)勢價格，歡迎新老客戶咨詢認(rèn)購。

產(chǎn)品詳細(xì)信息

名稱：雞傳染性喉氣管炎病毒PCR診斷試劑盒

規(guī)格： 20T/50T

品牌：上海滬崢

【用途】 用于雞傳染性喉氣管炎病毒的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

【操作步驟】

1. 病料處理：

   取適量病料鼻、氣管、支氣管和喉部等組織，于滅菌研缽充分研磨，用PBS液按照1：5稀釋成均勻乳劑， -20℃ 反復(fù)凍融3次以上。

2 . DNA的抽提

(1) 取已凍融好的病料，8000r/min離心5min，取上清（或T，T為質(zhì)控樣品）447μl，加50μl SR-I和3μl SR-II， 50℃ 水浴1-2h，并不時顛倒混勻一下。

(2) 加入等量酚：氯仿（1：1），漩渦振蕩20秒， 4℃ ，12000r/min，離心5min。

(3) 取上清，加入等量氯仿，振蕩混勻， 4℃ ，12000r/min，離心5min。

(4) 取400μl上清，加入800μl無水乙醇，再加40μl SR-III，混勻。 -20℃ 放置30~120min， 4℃ 、12000r/min，離心10min，小心棄上清，沉淀即為DNA。用75%乙醇（滅菌雙蒸水配，每次加入500μl）洗滌2次，小心吸去75%乙醇，勿使DNA丟失，室溫晾干或超凈工作臺風(fēng)干15-25min，加入15μl TU-5溶解即為模板，即用或 -20℃ 保存?zhèn)溆谩?/p>

 3 .PCR操作 

4.電泳：

    稱量 0.25g 瓊脂糖，放入錐形瓶，加入25mL 1×TAE液（可配置50×濃縮液，儲存?zhèn)溆茫谖⒉t中熔解，加入1μl的TU-9混勻。封閉好電泳槽，加入梳子，倒入瓊脂凝膠，待凝固后，將PCR產(chǎn)物6μl混合1.5μl TU-7，加樣于凝膠孔中，同時在相鄰孔加入3μl TU-8，在100V 電壓下，1×TAE液中電泳15分鐘，在紫外成像儀下觀察結(jié)果

雞傳染性喉氣管炎病毒PCR診斷試劑盒

【注意事項】

1. 每次使用，開蓋之前請先瞬時離心，使試劑沉于管底。

2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫擱置太久。

3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū)，避免交叉污染。

4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說明書進行，由于操作失誤、移液器不精確、定時不準(zhǔn)確造成無結(jié)果情況，不予負(fù)責(zé)。

5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁，可用鑷子夾取。

6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。

1. 將qPCR試劑盒解凍，理想溫度為5℃(±3℃)，置于冷凍架上。在室溫21℃(±5℃)下解凍，但必須在解凍后立即使用。




2. 準(zhǔn)備qPCR預(yù)混料(PCR管)。




3. 在qPCR預(yù)混料(PCR管)中分別加入以下物質(zhì)：




①5μl陰性質(zhì)控(DW)；②5μl樣本提取的DNA；③5μl陽性質(zhì)控DNA (PC)。




4. 輕輕混合，離心片刻。




5. 用PCR儀對樣品進行PCR反應(yīng)。