上海一研生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學(xué)試劑盒
牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒
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主營產(chǎn)品
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒 | Akabane Disease Virus(ADV)RTPCR | 50T |
普通PCR反應(yīng)流程:
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
反應(yīng)五要素:
牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應(yīng)分區(qū)域進行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
現(xiàn)貨促銷 毛蕊異黃酮 規(guī)格: LightCycler 480 Multiwell Plate 384 ,white
現(xiàn)貨促銷 毛蕊異黃酮-7-O-β-D葡萄糖苷 規(guī)格: LightCycler 480 Multiwell Plate 96, clear
現(xiàn)貨促銷 沒食子兒茶素 規(guī)格: LightCycler 480 Multiwell Plate 384, clear
現(xiàn)貨促銷 沒食子兒茶素沒食子酸酯 規(guī)格: LightCycler 480 Sealing Foil
現(xiàn)貨促銷 霉酚酸酯 規(guī)格: LightCycler Capillaries (20 μl)
現(xiàn)貨促銷 迷迭香酸 規(guī)格: LightCycler Capillaries (100 μl) M-Grade
現(xiàn)貨促銷 棉籽糖LightCycler 1536 Multiwell Plate
現(xiàn)貨促銷 棉子糖LightCycler 8-Tube Strips (Clear, for LC Nano)
現(xiàn)貨促銷 莫諾苷 (莫諾忍冬苷) 規(guī)格: LightCycler 8-Tube Strips (white)forLightCycler® 96/LightCycler® 480
現(xiàn)貨促銷 牡荊素 規(guī)格: EagleTaq Universal Master Mix (ROX), 5ml
現(xiàn)貨促銷 牡荊素葡萄糖苷 規(guī)格: EagleTaq Universal Master Mix (ROX), 10x5 ml
現(xiàn)貨促銷 擬人參皂苷-RT5 規(guī)格: MagNA Pure LC DNA Isolation Kit I
現(xiàn)貨促銷 鳥苷MagNA Pure LC DNA Isolation Kit II (Tissue)
現(xiàn)貨促銷 尿囊素MagNA Pure LC DNA Isolation Kit III (Bacteria, Fungi)
現(xiàn)貨促銷 檸檬酸MagNA Pure LC DNA Isolation Kit - Large Volume
現(xiàn)貨促銷 牛蒡子苷 規(guī)格: MagNA Pure LC DNA Isolation Kit I - Lysis/Binding Buffer Refill
牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒小鼠血管緊張素原(aGT)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CD4(Rabbit Anti-Human Mouse rat CD4 Palyclonal Anti-body 1kg
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CD40L(CD40 Ligand/TNFSF5/CD154 25mg
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CD44 CD44抗原 (多肽抗原 10mg
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CD45 CD45(白細胞共同抗原 5g
小鼠血管活性腸肽(VIP)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CD46/MCP(membrane cofactor protein 1g
小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CD5 CD5 多肽抗原 250mg
小鼠雄烯二酮(ASD)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CD54/ICAM-1 細胞間粘附分子-1 1g
小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1 10mg