使用方法:

一、斯氏分枝桿菌LAMP試劑盒50次稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

產(chǎn)品名稱：斯氏分枝桿菌LAMP試劑盒50次

英文名稱：Lamp kit for Mycobacterium skrjabini

產(chǎn)品貨號：GOY7270

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 

下列是斯氏分枝桿菌LAMP試劑盒50次的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
靛玉紅雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試盒

艾黃素雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試盒

蔓荊子黃素雞內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試盒

桃葉珊瑚苷； 杜仲苷雞內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試盒

紫云英苷雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA試盒

千層紙素A雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA試盒

桑色素雞堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試盒

花旗松素雞堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試盒

異李素雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試盒

蒙花苷雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試盒

松屬素； 喬松素雞可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試盒

白楊素雞可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試盒

柚皮素； 4',5,7-三羥基黃烷酮雞表皮生長因子(EGF)ELISA試盒

金合歡素； 刺槐素雞表皮生長因子(EGF)ELISA試盒

銀杏素雞樣生長因子1(IGF-1)ELISA試盒
斯氏分枝桿菌LAMP試劑盒50次 脫輔酶Ａ結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 AK3 ELISA Kit 腺苷激酶3(AK3)ELISA試盒

科羅索;Corosolic acid 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 DCST1蛋白抗體 AK2 ELISA Kit 腺苷激酶2(AK2)ELISA試盒

肌醇; Isitol 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 脫輔合酶蛋白抗體 CAP2 ELISA Kit 腺苷環(huán)化酶關(guān)聯(lián)蛋白2(CAP2)ELISA試盒

槲皮苷;Quercitrin 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 DCUN1D4蛋白抗體 AK1 ELISA Kit 腺苷激酶1(AK1)ELISA試盒

槲皮素-3-O-β-D-葡糖糖-7-O- 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 短鏈脫酶/還原酶家族4樣2蛋白抗體 CAP1 ELISA Kit 腺苷環(huán)化酶關(guān)聯(lián)蛋白1(CAP1)ELISA試盒

格列風(fēng)內(nèi)酯;Griffonilide 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 DDRGK1蛋白抗體 ADCY9 ELISA Kit 腺苷環(huán)化酶9(ADCY9)ELISA試盒

佛手柑內(nèi)酯;Bergapten 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 DENND2A蛋白抗體 ADCY8 ELISA Kit 腺苷環(huán)化酶8(ADCY8)ELISA試盒

冬綠苷;Gaultherin 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 DENND1B蛋白抗體 ADCY7 ELISA Kit 腺苷環(huán)化酶7(ADCY7)ELISA試盒

蛋氨;L-Methionine 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 
技術(shù)保護(hù)點(diǎn):

一種用于檢測螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對外引物和一對內(nèi)引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！