建立檢測(cè)靜脈注射人血免疫球蛋白的抗補(bǔ)體活性的ELISA方法及其相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品.方法用C1q包被酶標(biāo)板,以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的金黃色葡萄球菌蛋白A(SPA-HRP)作為酶標(biāo)記物,鄰苯二胺為底物.結(jié)果應(yīng)用ELISA法檢測(cè)靜脈注射用人免疫球蛋白抗補(bǔ)體活性具有準(zhǔn)確性高(97.2%),精確性好(試驗(yàn)內(nèi)精密度為6.7%,試驗(yàn)間精密度為9.1%),特異性強(qiáng),靈敏性高(測(cè)定限度為0.2ACA單位,測(cè)量限度為0.3ACA單位)等特點(diǎn).結(jié)論ELISA法檢測(cè)抗補(bǔ)體活性簡(jiǎn)便,快捷,準(zhǔn)確.

      探討C3d與C3d-IC的測(cè)定方法及其與疾病的關(guān)系。方法:用抗人C3和抗人IgG r-球蛋白組份作為固相反應(yīng)物.建立了檢測(cè)(23d及C3d-IC的ELISA法.并對(duì)各類疾病患者血清C3d與C3d-IC的水平進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果:發(fā)現(xiàn)慢性腎炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、慢性乙型肝炎及肺炎患者血清中C3d總體水平均較對(duì)照組顯著增高,分別有58.5%~72.2%的患者C3d含量高于正常上限(P<0.01).且該類患者亦有較高的C3d—IC陽(yáng)性檢出率(肺炎患者除外)。本研究表明,C3d—IC陽(yáng)性者,其血清C3d含量均高于正常水平.二者具有顯著的相關(guān)性。結(jié)論:C3d—IC與補(bǔ)體的起始有直接關(guān)系,因而C3d—IC與C3d可以看作是疾病或組織損傷及補(bǔ)體活化反應(yīng)的重要參考指標(biāo)。

     為了更好地測(cè)定人血清中補(bǔ)體C3d片及荷C3d的免疫復(fù)合物,采用酶免疫吸附技術(shù)建立了測(cè)定C3d及荷C3dIC的方法,其敏感度為0.05mg/L,工作范圍為0.11-50mg/L,批內(nèi),批間CV分別為6.3%和8.8%,上率為97%

     探討腎炎患者補(bǔ)體時(shí)活化單核巨噬細(xì)胞 (CD16 + Mo MΦ)膜輔因子蛋白 (MCP)、促衰變因子 (DAF)及同種限制因子 2 0 (HRF 2 0 )表達(dá)水平。方法 :采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定 136例腎小球腎炎患者血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF和HRF 2 0表達(dá)水平 ,采用ELISA法測(cè)定血清C3d及荷C3d 免疫復(fù)合物的 (C3d IC)水平。結(jié)果 :MC病人血清C3d、C3d IC水平及血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HFR 2 0表達(dá)水平與正常組無(wú)顯著差異 (P >0 0 5 ) ,GS、MN及PGN病人血清C3d水平、血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HRF 2 0表達(dá)水平及MN、PGN病人C3d IC水平均顯著高于正常組 (P <0 0 1) ,且MCP、DAF、HRF 2 0表達(dá)水平與血清C3d水平呈顯著正相關(guān) (P <0 0 1)。結(jié)論 :腎小球腎炎補(bǔ)體時(shí)血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HRF 2 0表達(dá)水平顯著上調(diào) ,以保護(hù)CD16 + Mo MΦ不被的補(bǔ)體損傷。從而 ,CD16 + Mo MΦ浸潤(rùn)腎組織并產(chǎn)生促炎作用 ,參于腎小球腎炎的發(fā)病及發(fā)展。

慢性乙型性肝炎患者需要長(zhǎng)期,與目前效果欠佳和患者免疫無(wú)法完全控制復(fù)制有關(guān)。尋找預(yù)測(cè)療效的指標(biāo)對(duì)于慢性乙型性肝炎患者的是十分必要的。既往研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)前基線HBV DNA載量、HBsAg和HBeAg定量可以預(yù)測(cè)干擾素或核苷類的療效,但是它們均為反映患者體內(nèi)量的預(yù)測(cè)指標(biāo)。最近,許多前基線核心抗體(Anti-HBc)水平可以有效預(yù)測(cè)干擾素和核苷類慢性乙型性肝炎患者的療效。Anti-HBc是針對(duì)乙肝核心抗原(HBcAg)的特異性抗體,其在慢性HBV感染患者中升高的原因,及其與HBcAg表達(dá)的關(guān)系未有明確報(bào)道。Anti-HBc水平與患者效果相關(guān)是因?yàn)槠淠芊从硻C(jī)體針對(duì)HBV特異性免疫反應(yīng)水平還是具有直接的功能,仍有待進(jìn)一步探討。