豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
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豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
南京博研生物科技有限公司 ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV) IgM 抗體ELISA檢測。
為了研制長效犬β干擾素(Ca IFNb)基因工程產(chǎn)品,用聚合酶鏈反應從犬基因組DNA擴增Ca IFNb成熟肽編碼序列,插入類彈性蛋白多肽(ELP)融合表達載體,將重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌BLR(DE3),用IPTG誘導Ca IFNb-ELP表達,利用ELP介導的溫度敏感可逆相變循環(huán)(ITC)進行純化,用50%細胞病變試驗檢測干擾素活性,用50%小鼠血漿孵育法檢測體外半衰期,并與融合組氨酸標簽的His-Ca IFNb進行比較.結(jié)果顯示,在≤28℃條件下,90%Ca IFNb-ELP為可溶性表達,His-Ca IFNb以不溶性包涵體表達;在優(yōu)化條件下進行1輪ITC,獲得的Ca IFNb-ELP的純度為96%,顯著高于以包涵體純化的His-Ca IFNb的純度(85%);Ca IFNb-ELP的活性為1×105 U/mg,比His-Ca IFNb的活性高10倍;Ca IFNb-ELP的體外半衰期〉24 h,顯著長于His-Ca IFNb的體外半衰期(12 h).結(jié)果表明,Ca IFNb-ELP具有表達水平高,純化簡單和體外半衰期較長等優(yōu)點,有望作為長效干擾素開發(fā)利用.
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬白細胞介素1(IL-1)水平.用純化的豬白細胞介素1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入豬白細胞介素1,再與HRP標記的IL-1抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色.TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色.顏色的深淺和樣品中的IL-1呈正相關.用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬白細胞介素1(IL-1)濃度.