豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

南京博研生物科技有限公司  ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎（HEV） IgM 抗體ELISA檢測(cè)。

 豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

為了研制長(zhǎng)效犬β干擾素(Ca IFNb)基因工程產(chǎn)品,用聚合酶鏈反應(yīng)從犬基因組DNA擴(kuò)增Ca IFNb成熟肽編碼序列,插入類(lèi)彈性蛋白多肽(ELP)融合表達(dá)載體,將重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌BLR(DE3),用IPTG誘導(dǎo)Ca IFNb-ELP表達(dá),利用ELP介導(dǎo)的溫度敏感可逆相變循環(huán)(ITC)進(jìn)行純化,用50%細(xì)胞病變?cè)囼?yàn)檢測(cè)干擾素活性,用50%小鼠血漿孵育法檢測(cè)體外半衰期,并與融合組氨酸標(biāo)簽的His-Ca IFNb進(jìn)行比較.結(jié)果顯示,在≤28℃條件下,90%Ca IFNb-ELP為可溶性表達(dá),His-Ca IFNb以不溶性包涵體表達(dá);在優(yōu)化條件下進(jìn)行1輪ITC,獲得的Ca IFNb-ELP的純度為96%,顯著高于以包涵體純化的His-Ca IFNb的純度(85%);Ca IFNb-ELP的活性為1×105 U/mg,比His-Ca IFNb的活性高10倍;Ca IFNb-ELP的體外半衰期〉24 h,顯著長(zhǎng)于His-Ca IFNb的體外半衰期(12 h).結(jié)果表明,Ca IFNb-ELP具有表達(dá)水平高,純化簡(jiǎn)單和體外半衰期較長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn),有望作為長(zhǎng)效干擾素開(kāi)發(fā)利用.

 豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬白細(xì)胞介素1(IL-1)水平.用純化的豬白細(xì)胞介素1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入豬白細(xì)胞介素1,再與HRP標(biāo)記的IL-1抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色.TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色.顏色的深淺和樣品中的IL-1呈正相關(guān).用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬白細(xì)胞介素1(IL-1)濃度.