液相色譜檢測(cè)生物藥中蛋白質(zhì)雜質(zhì)殘留

目前臨床上已經(jīng)規(guī)模應(yīng)用生物技術(shù)藥物，為制藥工業(yè)帶來(lái)了變革和機(jī)遇，但在其生產(chǎn)過(guò)程中涉及細(xì)菌的培養(yǎng)、蛋白質(zhì)的分離純化等，過(guò)程中非常容易引入生產(chǎn)用細(xì)菌中的其他蛋白質(zhì)，或在貯存環(huán)境摻雜相關(guān)雜質(zhì)，如前體、異構(gòu)體及某些降解產(chǎn)物等，具有高度的不均一性和不確定性。蛋白質(zhì)類雜質(zhì)是一個(gè)普遍且相對(duì)復(fù)雜的生產(chǎn)問題，在生產(chǎn)過(guò)程中分辨所有蛋白雜質(zhì)難度非常大，但為增加產(chǎn)品安全性，對(duì)雜蛋白進(jìn)行分析和控制的重要性不言而喻。

分析蛋白雜質(zhì)主要技術(shù)包含：高效液相色譜和免疫學(xué)分析（ELISA和West‐ernblot）凝膠電泳、二維電泳及質(zhì)譜技術(shù)、毛細(xì)管電泳等，高效液相色譜法要求樣品能制成溶液，而不需要?dú)饣?，可直接用于分析難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定及高分子樣品，擴(kuò)大了色譜法的應(yīng)用范圍。

微源檢測(cè)查閱資料利用茵梔黃注射ye為藥物模型根據(jù)檢測(cè)波長(zhǎng)，采用紫外末端吸收的高效凝膠排阻色譜法對(duì)注射劑中的大分子蛋白進(jìn)行了檢測(cè)。

色譜條件：

精確量取2ml茵梔黃注射劑，用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后直接作為樣品溶液,

對(duì)照品溶液稱取牛血清白蛋白5.0mg，置于容量瓶中加流動(dòng)相溶解，稀釋制備成1000μg/mL的儲(chǔ)備液。分別精密量取適量的儲(chǔ)備液，加入流動(dòng)相進(jìn)行稀釋，混勻，得到濃度為40.0，20.0，10.0，5.00，2.50，1.25，0.625，0.312μg/mL的對(duì)照品溶液；

加標(biāo)樣品溶液的制備：稱取牛血清白蛋白3.80mg于量瓶中，加茵梔黃注射yr，溶解稀釋至刻度，制備成380μg/mL的儲(chǔ)備液，量取適量的儲(chǔ)備液，加入茵梔黃注射ye進(jìn)行稀釋混合得到，濃度為38.0，3.80，0.380μg/mL的樣品加標(biāo)溶液。

取對(duì)照品溶液、樣品溶液及加標(biāo)樣品溶液色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖

210nm波長(zhǎng)（a）、220nm波長(zhǎng)（b）處牛血清白蛋白（40.0μg/mL）色譜圖

目前國(guó)內(nèi)在已上市的來(lái)源于微生物、植物或動(dòng)物組織的蛋白質(zhì)藥物中，很多品種未對(duì)其生產(chǎn)過(guò)程引入或產(chǎn)品本身含有的相關(guān)雜蛋白進(jìn)行研究，產(chǎn)品質(zhì)量控制上缺少方法。本文通過(guò)茵梔黃注射劑舉例為其他同類藥物中的蛋白雜質(zhì)的檢測(cè)提供了一種可借鑒的檢測(cè)方法。

公司介紹：

       微源檢測(cè)，是集研發(fā)分析測(cè)試服務(wù)、藥物質(zhì)量研究、基因毒雜質(zhì)研究、元素雜質(zhì)研究、結(jié)構(gòu)確認(rèn)、生物藥分析服務(wù)等一體，面向全球的獨(dú)立第三方生物醫(yī)藥研發(fā)測(cè)試服務(wù)公司。

由國(guó)內(nèi)領(lǐng)先的科學(xué)服務(wù)企業(yè)上海泰坦科技股份有限公司（簡(jiǎn)稱：泰坦科技）參股成立，秉承“讓檢測(cè)精準(zhǔn)又高效”的價(jià)值觀：

l資質(zhì)實(shí)驗(yàn)室 CMA,CNAS，按照ISO-17025和GMP要求建立的實(shí)驗(yàn)室

l建設(shè)有1500+平米的高標(biāo)準(zhǔn)生物醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室

l專業(yè)技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)成員經(jīng)驗(yàn)豐富，3天出具檢測(cè)結(jié)果

l現(xiàn)有精密分析儀器100+臺(tái)，均安裝網(wǎng)絡(luò)版審計(jì)追蹤軟件

l已服務(wù)100+生物制藥企業(yè)

l現(xiàn)已成功完成2189個(gè)項(xiàng)目

l前期溝通、寄送樣品、檢測(cè)分析、出具報(bào)告全程一對(duì)一服務(wù) 

       微源檢測(cè)定制的個(gè)性化方案，為客戶提供了專業(yè)可靠，高效率、高質(zhì)量、合規(guī)的檢測(cè)分析服務(wù)。協(xié)助客戶解決了檢測(cè),分析,測(cè)試等各類問題，縮短了工藝驗(yàn)證或方法建立所用的時(shí)間，降低研發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，縮短研發(fā)周期，推進(jìn)產(chǎn)品的市場(chǎng)化進(jìn)程。