利用HPLC、MS/MS檢測技術(shù)檢測雞蛋中Vancomycin含量

    Vancomycin是由鏈霉菌產(chǎn)生的, 結(jié)構(gòu)復(fù)雜的糖肽類抗生素，藥力較強(qiáng)，具有腎毒性，只宜在其他抗生素對病菌無效時才會被短期使用于搶救，但在動物飼養(yǎng)中部分養(yǎng)殖者為追求利潤鋌而走險，Vancomycin成為了食品中危害人體健康的潛在危險，必須嚴(yán)肅對待。

Vancomycin的結(jié)構(gòu)圖

      高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLC-MS\MS）是集高效液相色譜（HPLC）對基質(zhì)復(fù)雜的組分的高分離度和質(zhì)譜（MS）對物質(zhì)準(zhǔn)確定性和高靈敏度于一體的檢測分析手段，適用于檢測基質(zhì)復(fù)雜的樣本。杭州微源檢測查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，利用HPLC-MS\MS對雞蛋樣品進(jìn)行了檢測。

      標(biāo)準(zhǔn)品溶液配制：精確稱取適量Vancomycin鹽酸鹽于容量瓶中，加入0.1%甲酸水溶液定容至刻度并進(jìn)行超聲溶解得到1000μg/mLVancomycin標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液；吸取1.0mLVancomycin標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液至容量瓶中，并用0.1%甲酸水：乙腈（95:5，V/V）溶液定容至刻度得到10μg/mLVancomycin混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液用0.1%甲酸水：乙腈（95:5，V/V）溶液稀釋，配置成濃度為5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L、100.0μg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液需在低溫環(huán)境避光保存，試驗過程中現(xiàn)用現(xiàn)配

樣本處理：取雞蛋可食部分約500g粉碎機(jī)攪碎，裝入潔凈容器密封，于-18℃以下保存。實驗稱取已處理雞蛋樣本5g若干份置于離心管中，加入提取液20mL，按照5.0μg/kg、10.0μg/kg、50.0μg/kg三個水平分別添加Vancomycin混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，同一水平測定10次。渦旋混勻后冷凍離心5min，將上層清液用纖維濾紙過濾轉(zhuǎn)移至另一離心管中后，加入0.5gPSA吸附劑，渦旋混勻，冷凍離心10min。

凈化：加入3mL0.1%甲酸甲醇溶液和6mL的2%甲酸水溶液活化StrataX-C柱，待活化結(jié)束后加入5mL待凈化樣本的上清液；加入3mL二次純水淋洗一次，純水流盡后加入3mL甲醇再淋洗一次，待淋洗完畢后將StrataX-C柱吹干，放置于試管，用3mL10%氨化甲醇進(jìn)行洗脫，完畢后將StrataX-C柱進(jìn)行氮吹，氮吹至近干，加入0.1%甲酸水：乙腈（95:5，V/V）1mL定容，使用渦旋混勻器對溶液進(jìn)行渦旋，過0.2μm的兩相膜，過濾后將處理好的樣本轉(zhuǎn)移到進(jìn)樣小瓶。

質(zhì)譜條件：離子源：ESI；掃描方式：正離子掃描；檢測方式多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；電離電壓：3.2kV；離子源溫度：110℃。

雞蛋樣本 X-C18（2.1mm×150mm，3.5μm）色譜柱分離效果

      通過HPLC-MS/MS法對雞蛋中Vancomycin進(jìn)行檢測，該方法精密度高重復(fù)性好，對禽畜的用藥量符合國家標(biāo)準(zhǔn)，為Vancomycin的殘留檢測和食品安全提供了實驗案例。

公司介紹：

       微源檢測，是集研發(fā)分析測試服務(wù)、藥物質(zhì)量研究、基因毒雜質(zhì)研究、元素雜質(zhì)研究、結(jié)構(gòu)確認(rèn)、生物藥分析服務(wù)等一體，面向全球的獨立第三方生物醫(yī)藥研發(fā)測試服務(wù)公司。

由國內(nèi)領(lǐng)先的科學(xué)服務(wù)企業(yè)上海泰坦科技股份有限公司（簡稱：泰坦科技）參股成立，秉承“讓檢測精準(zhǔn)又高效”的價值觀：

l資質(zhì)實驗室 CMA,CNAS，按照ISO-17025和GMP要求建立的實驗室

l建設(shè)有1500+平米的高標(biāo)準(zhǔn)生物醫(yī)藥實驗室

l專業(yè)技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊成員經(jīng)驗豐富，3天出具檢測結(jié)果

l現(xiàn)有精密分析儀器100+臺，均安裝網(wǎng)絡(luò)版審計追蹤軟件

l已服務(wù)100+生物制藥企業(yè)

l現(xiàn)已成功完成2189個項目

l前期溝通、寄送樣品、檢測分析、出具報告全程一對一服務(wù) 

       微源檢測定制的個性化方案，為客戶提供了專業(yè)可靠，高效率、高質(zhì)量、合規(guī)的檢測分析服務(wù)。協(xié)助客戶解決了檢測,分析,測試等各類問題，縮短了工藝驗證或方法建立所用的時間，降低研發(fā)風(fēng)險，縮短研發(fā)周期，推進(jìn)產(chǎn)品的市場化進(jìn)程。