一、技術(shù)背景：

骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒上海極威生物科技有限公司是一家具有高科技專業(yè)研發(fā)能力的新晉企業(yè)，產(chǎn)品覆蓋廣泛，擁有優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，憑借極威生物品牌的技術(shù)和服務(wù)基礎(chǔ)，快速便捷的供貨體系，實(shí)惠經(jīng)濟(jì)的解決方案，受到全球?qū)嶒?yàn)室的好評(píng)，成為迅速崛起的佼佼者！

10月14日下午2點(diǎn)30分，據(jù)極威生物報(bào)道骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒優(yōu)惠消息，Elisa試劑盒半價(jià)試用，買三送一，買五送二，更多優(yōu)惠咨詢客服。

二：產(chǎn)品介紹：

指標(biāo)名稱：骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒   

規(guī)格：48T×1/盒、96T×1/盒

品牌：極威生物

運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸

保存溫度：2-8℃

貨期：現(xiàn)貨直達(dá)

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

所需樣本體積：保險(xiǎn)量50ul

適用范圍：僅供科研課題研究，不得用于臨床診斷。

檢測(cè)樣本種類：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細(xì)胞上清液，腦脊液，灌洗液，糞便等樣本

極威供應(yīng)屬種有：大鼠、小鼠、子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物、魚、昆蟲ELISA試劑盒等

樣本處理方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

三、骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒原理

本試劑盒系由預(yù)包被的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)血清、血漿樣本中抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有指標(biāo)抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有抗體。

四、骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒試劑盒組成

序號(hào) 名稱 規(guī)格（48T×1） 規(guī)格（96T×1）

1. 酶標(biāo)板   48T×1  96T×1

2. 酶標(biāo)記物    5.5ml×1   11ml×1

3. 抗體工作液    5.5ml×1   11ml×1

4. 20X濃縮洗滌液 20ml×1  40ml×1

5. 底物液A      3ml×1     6ml×1

6. 底物液B     3ml×1     6ml×1

7. 終止液     3ml×1   66ml×1

8. 陽(yáng)性對(duì)照   0.5 ml×1 1.0 ml×1

9. 陰性對(duì)照   0.5 ml×1 1.0 ml×1

10. 蓋板膜 1張 1張

11. 自封袋 1個(gè) 1個(gè)

12. 說明書 1份 1份

五、骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒樣品準(zhǔn)備

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

注意：ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

六、骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒檢驗(yàn)方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A值）。

七、骨成型蛋白(BMP)ELISA試劑盒問題解答

ELISA試劑盒客戶：ELISA試驗(yàn)方法的局限性是指什么？

極威生物解答：該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)血清、血漿中抗體，根據(jù)A值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評(píng)估。

ELISA試劑盒客戶：ELISA試劑盒的儲(chǔ)存及有效期是多少？

極威生物解答：于2～8℃避光保存，有效期為6個(gè)月。

包被板開封后請(qǐng)于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。

ELISA試劑盒客戶：ELISA檢測(cè)試劑盒適用儀器有哪些？

極威生物解答： 含450nm、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。

ELISA試劑盒客戶：如果是尿液樣本要怎么收集呢？

極威生物解答：尿液：用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

ELISA試劑盒客戶：ELISA樣本是細(xì)胞培養(yǎng)上清的話要怎么收集？

極威生物解答：細(xì)胞培養(yǎng)上清：A、檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。B、檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

ELISA試劑盒客戶：ELISA組織標(biāo)本要怎么采集和保存呢？

極威生物解答：組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

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