極威生物上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒48T免費(fèi)代測(cè)【樣本處理及要求】

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒上海極威生物科技有限公司是一家具有高科技專(zhuān)業(yè)研發(fā)能力的新晉企業(yè)，產(chǎn)品覆蓋廣泛，擁有優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，憑借極威生物品牌的技術(shù)和服務(wù)基礎(chǔ)，快速便捷的供貨體系，實(shí)惠經(jīng)濟(jì)的解決方案，受到全球?qū)嶒?yàn)室的好評(píng)，成為迅速崛起的佼佼者！

10月14日下午2點(diǎn)30分，據(jù)極威生物報(bào)道上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒優(yōu)惠消息，Elisa試劑盒半價(jià)試用，買(mǎi)三送一，買(mǎi)五送二，更多優(yōu)惠咨詢客服。

指標(biāo)名稱(chēng)：上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒   

規(guī)格：48T×1/盒、96T×1/盒

品牌：極威生物

運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸

保存溫度：2-8℃

貨期：現(xiàn)貨直達(dá)

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

所需樣本體積：保險(xiǎn)量50ul

適用范圍：僅供科研課題研究，不得用于臨床診斷。

檢測(cè)樣本種類(lèi)：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細(xì)胞上清液，腦脊液，灌洗液，糞便等樣本

極威供應(yīng)屬種有：大鼠、小鼠、dun鼠、子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物、魚(yú)、昆蟲(chóng)ELISA試劑盒等

一、上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒原理

本試劑盒系由預(yù)包被的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)血清、血漿樣本中抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有指標(biāo)抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有抗體。

二、上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒試劑盒組成

序號(hào) 名稱(chēng) 規(guī)格（48T×1） 規(guī)格（96T×1）

1. 酶標(biāo)板   48T×1  96T×1

2. 酶標(biāo)記物    5.5ml×1   11ml×1

3. 抗體工作液    5.5ml×1   11ml×1

4. 20X濃縮洗滌液 20ml×1  40ml×1

5. 底物液A      3ml×1     6ml×1

6. 底物液B     3ml×1     6ml×1

7. 終止液     3ml×1   66ml×1

8. 陽(yáng)性對(duì)照   0.5 ml×1 1.0 ml×1

9. 陰性對(duì)照   0.5 ml×1 1.0 ml×1

10. 蓋板膜 1張 1張

11. 自封袋 1個(gè) 1個(gè)

12. 說(shuō)明書(shū) 1份 1份

三、上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒樣品準(zhǔn)備

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋?zhuān)ㄈ?μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

四、上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒檢驗(yàn)方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A值）。

五、上皮型鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒問(wèn)題解答

ELISA試劑盒客戶：ELISA試驗(yàn)方法的局限性是指什么？

極威生物解答：該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)血清、血漿中抗體，根據(jù)A值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評(píng)估。

ELISA試劑盒客戶：ELISA試劑盒的儲(chǔ)存及有效期是多少？

極威生物解答：于2～8℃避光保存，有效期為6個(gè)月。

包被板開(kāi)封后請(qǐng)于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。

ELISA試劑盒客戶：ELISA檢測(cè)試劑盒適用儀器有哪些？

極威生物解答： 含450nm、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。

ELISA試劑盒客戶：如果是尿液樣本要怎么收集呢？

極威生物解答：尿液：用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

ELISA試劑盒客戶：ELISA樣本是細(xì)胞培養(yǎng)上清的話要怎么收集？

極威生物解答：細(xì)胞培養(yǎng)上清：A、檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。B、檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

ELISA試劑盒客戶：ELISA組織標(biāo)本要怎么采集和保存呢？

極威生物解答：組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

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