HPLC/MS分析茶皂素黃酮苷組分

黃酮苷屬黃酮類，是一種茶多酚物質(zhì)。黃酮類化合物是存在于自然界的、具有2-苯基色原酮結(jié)構(gòu)的化合物。其羥基衍生物多具黃色,故又稱黃堿素或黃酮。目前黃酮類化合物的檢測(cè)多以系統(tǒng)溶劑分離法或是柱層析法等作為主要實(shí)驗(yàn)方法。微源實(shí)驗(yàn)室查閱文獻(xiàn)資料，利用HPLC/MS分析方法以日常中茶麩茶皂素為例實(shí)驗(yàn)了黃酮苷組分的檢測(cè)。

將茶麩用正己烷溶劑脫脂，干燥粉碎后取用適量，加入120％(W/W)的乙醇溶液浸取，液泵循環(huán)1.5h左右濾出溶劑，重復(fù)操作浸提3次合并濾液，得皂素液。將皂素液與萃取劑在分液漏斗中混合，振搖10min，靜置分層。分離干燥后得到樣品，準(zhǔn)確稱量2.0mg樣品用1ml色譜純MeOH溶解過濾待進(jìn)樣檢測(cè)。按照表格條件得到茶皂素HPLC分析圖譜如下：

從分析圖譜來看，峰1和峰2峰面積較大，推測(cè)為主要的黃酮苷成分，可以將這兩種主要黃成分分離并分別收集，采用紫外吸收結(jié)合香草醛顯色，判斷確認(rèn)這兩個(gè)峰是黃酮苷類化學(xué)成分。分離純化后的均為純的化合物，無雜峰出現(xiàn)，得到2種黃酮苷的HPLC分析圖譜。

利用HPLC對(duì)樣品進(jìn)行分析，達(dá)到分離技術(shù)條件，再以HPLC/MS分析確定化合物的分子量等結(jié)構(gòu)確認(rèn)信息，不僅可以判斷分子離子峰，還可以在黃酮苷類化合物中較快地看出糖的個(gè)數(shù)及糖分子量，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程重復(fù)性好得到數(shù)據(jù)精密度高，各項(xiàng)組分的檢測(cè)結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)。

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