測定意義：
脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程，脂質(zhì)過氧化物（LPO）是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物，即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO，使的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此，LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo)，與某些疾病的病理過程，如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化（AS）及心腦血管疾病，以及衰老等生理過程密切相關(guān)。

測定原理：

LPO在酸性條件下加熱，產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA，MDA與硫代酸(thiobarbituric acid，TBA)縮合，生成紅色產(chǎn)物，在535nm有最大吸收峰。

需自備的儀器和用品：

分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
基本信息：
產(chǎn)品名稱：脂質(zhì)過氧化物（LPO）微量法檢測試劑盒
測試方法: 微量法
規(guī)格 : 100管/96樣
貨號：GOY-01S6411
分類：氧化與抗氧化系列

試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支（EP管中），2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
測定步驟：
1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到510 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸餾水，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
6. 測定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管，測定管和對照管每個樣均需做。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：產(chǎn)品僅用于科研
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定：
a. 參考下表使用96孔板加入各個組分，注意設(shè)置樣品孔和各種空白對照孔。
注意：加入反應(yīng)啟動工作液后反應(yīng)即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動工作液的時間先后差異而導(dǎo)致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明：孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異，但為保證檢測結(jié)果的一致性，推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片，可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進(jìn)行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計算：
a. 抑制百分率的計算：
參考如下計算公式計算抑制百分率：
抑制百分率＝[(A空白對照1－A空白對照2)－(A樣品－A空白對照3)] / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果沒有設(shè)置空白對照3，則可以把計算公式簡化為：
抑制百分率＝(A空白對照1－A樣品) / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果計算出來的抑制百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測定出來的抑制百分率偏高，則需適當(dāng)稀釋樣品；如果測定出來的抑制百分率偏低，則需重新準(zhǔn)備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義：在上述化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為50% 時，反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位 (unit)。注意：SOD的活力單位的定義方式有很多種，不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進(jìn)行適當(dāng)換算。

小鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： ALB ELISA Kit

大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA檢測試劑盒RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T

人S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)免疫試劑盒 Human S100A12 ELISA Kit

英文名稱MouseBNPELISAKit小鼠腦素(BNP)規(guī)格：96T/48T

αSMA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次

Rabbitprothrombinfragme1+2,F1+2ELISA試劑盒兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬氧化酶(DAO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human Staphylococcus aureus eerotoxins (SE) ELISA Kit 人金葡菌腸毒素(SE)ELISA試劑盒

PorcineHydrocoisone,HYDELISAKit 豬輕化1(HYD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlpha2-MG(HumanAlpha2macroglobulin)ELISAKit人α2巨球蛋白規(guī)格：48T/96T

血液(lithium)化學(xué)比色法定量檢測試劑盒50次

NudemouseAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Anti-HCV-NS1/FITC 熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BAGE3 /抗原2.3抗體 規(guī)格 0.2ml

5-HTR1A (5-HT1A (5-hydroxytryptamine/serotonin receptor 1A; 5HT1a; ADRBRL1; ADRB2RL1; HTR1A) 5-羥色胺受體1A(多肽) 0.5mg

GRAMD3 英文名稱： 丙型肝炎病毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
脂質(zhì)過氧化物（LPO）微量法檢測試劑盒Anti-Phospho-c-Fos (Thr325) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化c-fos抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-IL-23R/FITC 熒光素標(biāo)記抗白介素-23受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CD133 antigen 造血干細(xì)胞抗原CD133抗體 規(guī)格 0.1ml

Klf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原 0.5mg

CD275 英文名稱： 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh SREBP-2 膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-IL-23R/FITC 熒光素標(biāo)記抗白介素-23受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml