測定意義：
測定對象中各種抗氧化物質和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學、醫(yī)學和藥學研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液，細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測定原理：

ABTS法是使用最廣泛的間接檢測方法，可用于親水性和親脂性物質抗氧化能力測定。ABTS經(jīng)氧化后生成穩(wěn)定的藍綠色陽離子自由基 ABTS+，能溶于水相或酸性乙醇介質中，在734nm處有最大吸收。被測物質加入ABTS+溶液后，所含抗氧化成分能與ABTS+發(fā)生反應而使反應體系褪色。在734nm檢測吸光度的變化，并以Trolox作為對照體系量化抗氧化物質的抗氧化能力。

自備實驗用品：

恒溫水浴鍋、低溫離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
基本信息：
產(chǎn)品名稱：總抗氧化能力（ABTS法）微量法檢測試劑盒
測試方法: 微量法
規(guī)格 : 100管/96樣
貨號：GOY-01S6439
分類：氧化與抗氧化系列

試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍綠色之前均可使用。
標準品：液體×1支（EP管中），2 μmol/mL酚標準液，4℃保存。
測定步驟：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30min，調節(jié)波長到510 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：取EP管，加入4μL標準品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A標準管。
5. 對照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸餾水，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
6. 測定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
其中標準管和空白管只需做一管，測定管和對照管每個樣均需做。
注意：空白管和標準管只需測定一次。

操作步驟：
1. 樣品的準備：產(chǎn)品僅用于科研
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定：
a. 參考下表使用96孔板加入各個組分，注意設置樣品孔和各種空白對照孔。
注意：加入反應啟動工作液后反應即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應啟動工作液的時間先后差異而導致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明：孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異，但為保證檢測結果的一致性，推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片，可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計算：
a. 抑制百分率的計算：
參考如下計算公式計算抑制百分率：
抑制百分率＝[(A空白對照1－A空白對照2)－(A樣品－A空白對照3)] / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果沒有設置空白對照3，則可以把計算公式簡化為：
抑制百分率＝(A空白對照1－A樣品) / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果計算出來的抑制百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內。如果測定出來的抑制百分率偏高，則需適當稀釋樣品；如果測定出來的抑制百分率偏低，則需重新準備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義：在上述化酶藕聯(lián)反應體系中抑制百分率為50% 時，反應體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位 (unit)。注意：SOD的活力單位的定義方式有很多種，不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進行適當換算。

小鼠白介素16(IL-16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒

Humandeoxypyridinoline,DPDELISAKit 人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancailageoligomericprotein,COMPELISA試劑盒人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉基因棉花MON1445品系試劑盒20次

HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human basic fibroblast growth factor 4 (bFGF-4) ELISA Kit 人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒

PorcineTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAmAC-1ELISAKit大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1規(guī)格：48T/96T

血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Porcineacetylcholine,ACHELISAKit豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Cox V-IgG(Human Coxsackie virus IgG) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-KLK4 激肽釋放酶4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh LAMP-1/CD107a/LAMPA 溶酶體相關膜蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

8-iso-PG(Human 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 人8異前列腺素 96T

PEF1 英文名稱： 調亡誘導因子家族蛋白PEF1抗體 0.2ml

CCDC39 英文名稱： 卷曲螺旋結構域蛋白39抗體 0.2ml

Anti-KLK4 激肽釋放酶4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
總抗氧化能力（ABTS法）微量法檢測試劑盒Anti-Zyxin/FITC 熒光素標記斑聯(lián)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

DCX(Doublecortin) 雙皮質素抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

膜粘連蛋白 V抗體 Anti-Annexin V 0.1ml

ZBTB48 英文名稱： 鋅指蛋白855抗體 0.2ml

DACT1 英文名稱： 肝癌新基因3蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 0酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml

DCX(Doublecortin) 雙皮質素抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg