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主營產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀(jì)), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備, 測量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
β半乳糖苷酶(βGAL)微量法檢測試劑盒
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測定步驟:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
6. 測定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個樣均需做。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
基本信息:
產(chǎn)品名稱:β半乳糖苷酶(βGAL)微量法檢測試劑盒
測試方法: 微量法
規(guī)格 : 100管/48樣
貨號:GOY-01S6749
分類:糖代謝系列
測定意義:
β-GAL(EC
測定原理:
β-GAL分解對-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計(jì)算β-GAL活性。
自備用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:產(chǎn)品僅用于科研
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定:
a. 參考下表使用96孔板加入各個組分,注意設(shè)置樣品孔和各種空白對照孔。
注意:加入反應(yīng)啟動工作液后反應(yīng)即會開始,可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動工作液的時間先后差異而導(dǎo)致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明:孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異,但為保證檢測結(jié)果的一致性,推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片,可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進(jìn)行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計(jì)算:
a. 抑制百分率的計(jì)算:
參考如下計(jì)算公式計(jì)算抑制百分率:
抑制百分率=[(A空白對照1-A空白對照2)-(A樣品-A空白對照3)] / (A空白對照1-A空白對照2) × 100%
如果沒有設(shè)置空白對照3,則可以把計(jì)算公式簡化為:
抑制百分率=(A空白對照1-A樣品) / (A空白對照1-A空白對照2) × 100%
如果計(jì)算出來的抑制百分率小于30% 或大于70% ,則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測定出來的抑制百分率偏高,則需適當(dāng)稀釋樣品;如果測定出來的抑制百分率偏低,則需重新準(zhǔn)備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義:在上述化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為50% 時,反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位 (unit)。注意:SOD的活力單位的定義方式有很多種,不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進(jìn)行適當(dāng)換算。
小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 ,英文名: CXCL16 ELISA Kit
大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA檢測試劑盒RatlymphocytefactorELISAKit 96T/48T
人c-sis 免疫試劑盒 Human c-sis ELISA Kit
英文名稱MouseU-TSHELISAKit小鼠高靈敏度促性腺激素(U-TSH)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒(含AP二抗)20次
Ratai-thrombieceptor,AELISA試劑盒大鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human melatonin sulfate (MS) ELISA Kit 人褪黑色素(MS)ELISA試劑盒
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeni-iodothyronine,T3ELISA試劑盒雞三甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞TNFALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseEsiol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TRAF1 壞死因子受體相關(guān)因子1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Calmon/CAM 鈣調(diào)節(jié)素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PDGF-B 血小板源性生長因子-B抗體 規(guī)格 0.1ml
Amyloid Beta 淀粉樣蛋白 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TCRG 英文名稱: T細(xì)胞受體γ抗體 0.2ml
CCDC85B 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 0.2ml
Anti-Calmon/CAM 鈣調(diào)節(jié)素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
β半乳糖苷酶(βGAL)微量法檢測試劑盒Anti-CTSC/PALS/DPP-I/FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化原癌基因蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CC85C 卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體 規(guī)格 0.2ml
GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153) 生長抑制DNA損傷基因153抗原 0.5mg
ErbB 4 英文名稱: HER4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh SLC39A6 SLC39A6抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化原癌基因蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。