無酶細(xì)胞消化液

貨號(hào)：ZK-PL4110

品牌:子科生物ZIKER

描述：無酶細(xì)胞消化液不含蛋白消化酶，但能使貼壁細(xì)胞與培養(yǎng)瓶皿表面有效脫離達(dá)到分離細(xì)胞的目的。與常規(guī)胰蛋白酶消化方法相比，無酶細(xì)胞消化液作用溫和，不損傷和破壞細(xì)胞，不影響細(xì)胞生物學(xué)特性，是腫瘤細(xì)胞在體移植實(shí)驗(yàn)的最佳細(xì)胞脫壁方法。細(xì)胞用無酶消化液脫壁后，可直接進(jìn)行傳代培養(yǎng)或離心收集用于其它實(shí)驗(yàn)。由于未使用蛋白酶制劑，因此特別適于收集細(xì)胞進(jìn)行核蛋白和胞漿蛋白制備、Western Blot、免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)，同時(shí)能避免樣品蛋白降解，并避免蛋白酶制劑中的RNA酶對(duì)RNA的降解。

特點(diǎn)：

室溫孵育10分鐘，貼壁細(xì)胞即可從瓶皿脫落，溫和而有效

脫壁的細(xì)胞可用于連續(xù)傳代

培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行在體移植實(shí)驗(yàn)的最佳消化方法

避免蛋白酶過度消化細(xì)胞及降解樣品蛋白

制備胞核和胞漿蛋白、進(jìn)行Western Blot、免疫共沉淀

避免蛋白酶制劑中污染的RNA酶降解RNA

規(guī)格：100ml

儲(chǔ)存：4℃密封1年有效，可重復(fù)高壓滅菌。

操作步驟：

1. 用PBS洗滌單層培養(yǎng)細(xì)胞，盡可能完全去除瓶中液體。

2. 加入適量無酶細(xì)胞消化液使其覆蓋細(xì)胞表面，晃動(dòng)瓶皿，使所有細(xì)胞均充分接觸無酶消化液。

3. 室溫放置10分鐘或適宜時(shí)間，偶爾晃動(dòng)瓶皿，直到細(xì)胞完全脫壁?？杉尤爰?xì)胞培養(yǎng)基或2-3倍體積PBS緩沖液終止反應(yīng)。脫壁后可能有成片細(xì)胞連在一起的現(xiàn)象，屬于正常，如用作腫瘤移植，上述情況的產(chǎn)生可利于腫瘤細(xì)胞的生長。37oC時(shí)脫壁反應(yīng)會(huì)加速。

4. 500g離心5-10分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。

5. 收集的細(xì)胞可用于：

(1) 胞核胞漿蛋白制備；

(2) Western blot；

(3) 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)；

(4) DNA-蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)；

(5) RNA提??；

(6) 分瓶傳代。