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Hoechst33342染色液(即用型)
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Hoechst33342染色液(即用型)
貨號(hào):ZK-PL4217
品牌:子科生物ZIKER
描述:
Hoechst 33342,也稱(chēng)bisBenzimide H33342或HOE 33342,是一種可以穿透細(xì)胞mo膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33342染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33342也常用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33342的最大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后,最大激發(fā)波長(zhǎng)為350nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。本Hoechst 33342染色液為即用型,可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
儲(chǔ)存:
-20℃保存
有效期:
一年
濃度:
0.01mg/ml
操作步驟:
1. 固定的細(xì)胞或組織:
a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則先進(jìn)行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33342染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33342染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量Hoechst 33342染色液,覆蓋住樣品即可;對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品3倍體積的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 活細(xì)胞或組織:
a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33342染色液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液,對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè),活細(xì)胞或組織染色后應(yīng)立即觀察。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。