5%堿性品紅乙醇溶液

貨號(hào)：ZK-PL4214

品牌：子科生物ZIKER

描述：

二氨基聯(lián)苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是過氧化物酶（POD）的底物，DAB 顯色液主要用于免疫過氧化物酶法，適用于辣根過氧化物酶 HRP 標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過氧化物酶使底物發(fā)生反應(yīng)，于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物。免疫印記可直接在膜上顯示條帶。免疫組化標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫 5-20 分鐘，隨后在顯微鏡下觀察顯色情況，顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固。其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察，也可經(jīng) OsO4 處理后，增加反應(yīng)產(chǎn)物的電子密度，用于電鏡觀察。

規(guī)格：

溶液 A: 10ml 溶液 B：10ml

儲(chǔ)存:

-20℃避光密閉保存，一年有效。避免反復(fù)凍融。短期可 2-8℃保存。

使用說明：

1.對(duì)于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜，在與辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當(dāng)洗滌液洗滌 3-5 次，每次 3-5 分鐘。

2.取 900ul PBS（或雙蒸水），加入 50ul 溶液 A，50ul 溶液 B 混合均勻，即配成 DAB 工作液。

如需要更大體積工作液，可按比例放大。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配，配好后避光保存，1 小時(shí)內(nèi)使用，過期后請(qǐng)將剩余的液體廢棄。

3.向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液，確保能充分覆蓋樣品。

4.室溫避光孵育 3-10 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，避免光照，直至顯色至預(yù)期深淺。

5.去除 DAB 染色工作液，用蒸餾水洗滌 2-3 次即可終止顯色反應(yīng)。

對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品，顯色反應(yīng)終止后，可對(duì)其進(jìn)行其他染料復(fù)染。對(duì)于膜，顯色反應(yīng)終止后，可以室溫晾干避光保存。

注意:

1．DAB 溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出，應(yīng)確保結(jié)晶完全溶解再行使用；

2．顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，新鮮配制的工作液應(yīng)為無色或淺棕色，如顏色過深，請(qǐng)勿使用；

3．顯色時(shí)間嚴(yán)格控制，根據(jù)情況調(diào)整，以免顯色過度。固相膜顯色數(shù)小時(shí)后即會(huì)褪色，不能永久存在；

4．DAB 為可疑致癌物，請(qǐng)采取必要的防范措施。操作時(shí)應(yīng)戴手套，盡量避免與皮膚接觸，用后及時(shí)徹底沖洗，接觸 DAB 的實(shí)驗(yàn)用品最好經(jīng)洗液浸泡 24h 后使用。