概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)?。通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

牙齦卟啉單胞菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f唾液酸（SA）檢測(cè)   Apoptosis (TdT mediated by in situ end of the double labelling method) detection  Axitinib  319460-85-0  中文名：阿西替尼  分子式：C22H18N4OS 

唾液酸（SA）測(cè)試盒（帶SA標(biāo)準(zhǔn)）   Saliva acid (SA) test case (with SA standard)  Ampicillin Trihydrate  7177-48-2  中文名：氨芐西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

唾液酸（SA）測(cè)定試劑盒（帶SA標(biāo)準(zhǔn)）（比色法）                    Physaminimin C  1582259-03-7  中文名：  分子式：C28H38O8 

脫脂奶粉   100g  Amoxicillin trihydrate  61336-70-7  中文名：羥氨芐青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%   

脫氧核糖核酸酶I   100mg  Amoxicillin  26787-78-0  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2  度：99.0%  小鼠α羥基脫氫酶elisa試劑盒   小鼠α羥基脫氫酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α羥基脫氫酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α羥基脫氫酶試劑盒、小鼠α羥基脫氫酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Abscisic acid  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4  度：99.0%  小鼠α葡萄糖苷酶elisa試劑盒   小鼠α葡萄糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α葡萄糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α葡萄糖苷酶試劑盒、小鼠α葡萄糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  中文名：(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%  小鼠α干擾素elisa試劑盒   小鼠α干擾素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α干擾素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α干擾素試劑盒、小鼠α干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

2-Amino-3-Formylchromone  中文名：2-氨基-3-甲?；?/span>  分子式：C10H7NO3  度：98.0%  小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Acid Black 1  中文名：酸性黑 1  分子式：C22H14N6Na2O9S2  度：99.0%  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T小鼠性激素結(jié)合球蛋白(mouse SHBG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Methenolone acetate  中文名：美替諾龍醋酸酯  分子式：C22H32O3  度：98.0%

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Methoxydienone  2322-77-2  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2 

小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒   小鼠新生甲狀腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠新生甲狀腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠新生甲狀腺素試劑盒、小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Methasterone  中文名：甲基屈他雄酮  分子式：C21H34O2  度：98.0%

小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Metamizole sodium  中文名：安乃近  分子式：C13H16N3NaO4S  度：98.0%

小鼠心肽elisa試劑盒   小鼠心肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠心肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠心肽試劑盒、小鼠心肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Betamethasone  中文名：倍他米松  分子式：C22H29FO5

牙齦卟啉單胞菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸Hydroxyprogesterone acetate  中文名：醋酸羥孕酮  分子式：C23H32O4  度：98.0%  小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Methylprednisolone hemisuccinate  中文名：  分子式：C26H34O8  度：98.0%  小鼠抑瘤素mouse  M(mouse OSM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Methylprednisolone acetate  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  小鼠6--前列腺素F1a(mouse 6-k-PGF1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  中文名：  分子式：C22H30O4  度：98.0%  小鼠前列腺素E2(mouse PGE2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Methylprednisolone  中文名：甲基潑尼松龍  分子式：C22H30O5  度：98.0%  小鼠0脂酶A2(mouse sPLA2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝