服務流程：

高首鱘虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書1、根據客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針（染料法只需設計引物）

2、抽提DNA、RNA，并對RNA進行逆轉錄

3、實時熒光定量PCR

4、提供完整的實驗結果報告(檢測數據、溶解曲線、擴增曲線)

5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）

參數規(guī)格：

產品名稱：高首鱘虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

英文名稱：White Sturgeon Iridovirus(WSIV)

貨號: GOY-M4647

產品規(guī)格：50T

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

產品及特點:

是從土壤農桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因，是轉基因植物研究中最為常用的一種篩選標記基因，因此本公司根據探針法 qPCR 原理開發(fā)了專門用于檢測 鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板。

2. 根據 鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 保守區(qū)域設計引物和探針，能專一性地檢測出樣品中的

鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 成分，但不能檢測其他非 鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 成分。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 一管式閉管操作，降低了交叉污染。

5. 快速，整個檢測過程（按一個樣品計）所需時間僅為 2.0 小時。

6. 本只能用于科研，足夠 50 次 20uL 體系的探針法熒光定量 PCR。

操作步驟：

下列圖示以Venor Gem OneStep 支原體 常規(guī)PCR 檢測試劑盒 (一步法)，具體產品操作以說明書為準。

第1步：樣本處理：

第2步：試劑制備：

第3步：PCR體系建立：

第4步：啟動PCR反應

第5步：電泳結果分析

191bp為內控對照條帶，表明PCR反應正常。

當樣本存在支原體污染時，由于內控對照與支原體DNA存在競爭，內控對照條帶變弱（例如支原體DNA＞103拷貝）。

陽性對照中支原體DNA＞104拷貝，內控對照條帶會完全消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶，此條帶不影響檢測結果。

如果待測樣本對PCR產生抑制，則內控對照條帶變弱（和陰性對照相比），此時應先進行DNA抽提（推薦使用：Venor Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒），然后再檢測。

實時熒光定量PCR：

實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：

1）Ct值的重現性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性極好，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。

2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。

外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現性最好的定量方法，已得到全世界的公認，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

β尿激酶型纖溶酶原激活因子 (uPA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3  度：98.0%   

尿蛋白定性測試盒   Acid esterase stain                 3-Quinuclidinone  中文名：3-奎寧環(huán)酮  分子式：C7H11NO 

內脂素/內臟脂肪素   英文名稱：   Visfatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Visfatin  Otophylloside T  1642306-14-6  中文名：  分子式：C48H70O18 

內脂素 / 內臟脂肪素 (Visfatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Ondansetron  中文名：昂丹司瓊  分子式：C18H19N3O 

內源性糖皮質激素   英文名稱：   Human Glucocoicoid Endogenous   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GC  Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2

Acyclovir  59277-89-3  中文名：阿昔洛韋  分子式：5O3    快速H－E組織細胞及脫落細胞染液   Phosphate buffer               

4-Aminobenzophenone  1137-41-3  中文名：4-氨基二苯甲酮  分子式：C13H11NO    瑞-吉染色劑   100ml

N-Acetylcaprolactam  1888-91-1  中文名：N-乙酰己內酰胺  分子式：C8H13NO2    Wright's-GiemsaStainingSolion

4-Aminoantipyrine  1983/7/8  中文名：4-氨基安替比林  分子式：C11H13N3O    蛋白標準(5mg/mlBSA)   1ml

2-Amino-5-chlorobenzophenone  719-59-5  中文名：2-氨基-5-氯二苯甲酮  分子式：C13H10ClNO    1-乙   25g小鼠β內酰胺酶抑制劑elisa試劑盒   小鼠β內酰胺酶抑制劑試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β內酰胺酶抑制劑試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠β內酰胺酶抑制劑試劑盒、小鼠β內酰胺酶抑制劑eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     Enrofloxacin  93106-60-6  中文名：恩諾沙星  分子式：C19H22FN3O3 

小鼠β內啡肽受體elisa試劑盒   小鼠β內啡肽受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β內啡肽受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠β內啡肽受體試劑盒、小鼠β內啡肽受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Boldenone  中文名：寶丹酮  分子式：C19H26O2  度：98.0%

小鼠β內啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bisphenol P  2167-51-3  中文名：雙酚P  分子式：C24H26O2  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠β內啡肽受體(β-EPR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Hydrocortisone  50-23-7  中文名：氫化可的松  分子式：C21H30O5  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠β內啡肽elisa試劑盒   小鼠β內啡肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β內啡肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠β內啡肽試劑盒、小鼠β內啡肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     Boldenone  中文名：寶丹酮  分子式：C19H26O2

高首鱘虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Cleroindicin D  中文名：  分子式：C8H12O4  度：97.0%  兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1elisa試劑盒   兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒、兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Cleroindicin E  中文名：  分子式：C8H14O3  度：98.0%  兔子促甲狀腺素elisa試劑盒   兔子促甲狀腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子促甲狀腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子促甲狀腺素試劑盒、兔子促甲狀腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Methyl levulinate  中文名：  分子式：  度：%  兔子促黃體激素elisa試劑盒   兔子促黃體激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子促黃體激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子促黃體激素試劑盒、兔子促黃體激素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Cleroindicin C  中文名：  分子式：C8H12O3  度：%  兔子雌二醇elisa試劑盒   兔子雌二醇試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子雌二醇試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子雌二醇試劑盒、兔子雌二醇elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Cleroindicin B  中文名：  分子式：C8H14O3  度：96.0%  兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1elisa試劑盒   兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒、兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

使用方法：

一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。

三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）

10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數量相應增加2或3倍。

11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）