PCR實驗方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

概述：

含麩質(zhì)谷物源性探針法熒光定量PCR試劑盒圖片熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

s谷胱甘肽過氧化物酶elisa試劑盒   谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  6-Aminopenicillanic acid  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S  度：98.0%

谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）測定試劑盒（比色法）  Ranolazine dihydrochloride  中文名：鹽酸雷諾嗪  分子式：C24H35Cl2N3O4 

谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）測定試劑盒（比色法）                    Repaglinide  135062-02-1  中文名：瑞格列奈  分子式：Repaglinide 

谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）試劑盒   GR法   50管/48樣  Rengyol  93675-85-5  中文名：連翹環(huán)己醇  分子式：C8H16O3  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  連翹; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）試劑盒   DTNB法   50管/48樣  Rengyol  中文名：連翹環(huán)己醇  分子式：C8H16O3

Dabigatran etexilate  211915-06-9  中文名：  分子式：C34H41N7O5    人周期素依賴性激酶5elisa試劑盒   人周期素依賴性激酶5試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人周期素依賴性激酶5試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶5試劑盒、人周期素依賴性激酶5 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Ethyl 3-(3-amino-4-(methylamino)-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  212322-56-0  中文名：  分子式：C18H22N4O3    人周期素依賴性激酶4elisa試劑盒   人周期素依賴性激酶4試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人周期素依賴性激酶4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶4試劑盒、人周期素依賴性激酶4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

N-(4-Cyanophenyl)glycine  42288-26-6  中文名：  分子式：C9H8N2O2    人周期素依賴性激酶2elisa試劑盒   人周期素依賴性激酶2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人周期素依賴性激酶2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶2試劑盒、人周期素依賴性激酶2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate  139481-44-0  中文名：  分子式：C25H21N3O3    人周期素依賴性激酶1elisa試劑盒   人周期素依賴性激酶1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人周期素依賴性激酶1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶1試劑盒、人周期素依賴性激酶1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate  136304-78-4  中文名：  分子式：C22H19N3O2    人周期素依賴性激酶5(CDK-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝小鼠B因子(BF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Indapamide  26807-65-8  中文名：吲達帕胺  分子式：C16H16ClN3O3S 

小鼠B細胞瘤因子elisa試劑盒   小鼠B細胞瘤因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠B細胞瘤因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠B細胞瘤因子試劑盒、小鼠B細胞瘤因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Benzo-15-crown 5-ether  14098-44-3  中文名：苯并-15-冠5-醚  分子式：C14H20O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠B細胞刺激因子(mouse BAFF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Methylprednisolone acetate  53-36-1  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠B細胞刺激因子   英文名稱：   B lymphocyte stimulator   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BAFF  Dehydroepiandrosterone  中文名：脫氫表雄酮  分子式：C19H28O2 

小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzimidazole  51-17-2  中文名：苯并咪唑  分子式：C7H6N2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

含麩質(zhì)谷物源性探針法熒光定量PCR試劑盒圖片Candesartan ethyl ester  中文名：  分子式：C26H24N6O3    豬載脂蛋白A1elisa試劑盒   豬載脂蛋白A1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬載脂蛋白A1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬載脂蛋白A1試劑盒、豬載脂蛋白A1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Candesartan cilexetil  中文名：坎地沙坦西來替昔酯  分子式：C33H34N6O6    豬主要急性期蛋白elisa試劑盒   豬主要急性期蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬主要急性期蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬主要急性期蛋白試劑盒、豬主要急性期蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Candesartan  中文名：坎地沙坦  分子式：C24H20N6O3    豬上腺素elisa試劑盒   豬上腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬上腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬上腺素試劑盒、豬上腺素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Campsiketalin  中文名：  分子式：C10H20O4    豬沙門氏菌抗體elisa試劑盒   豬沙門氏菌抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬沙門氏菌抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬沙門氏菌抗體試劑盒、豬沙門氏菌抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Cabozantinib  中文名：卡博替尼  分子式：C28H24FN3O5    豬熱休克蛋白90elisa試劑盒   豬熱休克蛋白90試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬熱休克蛋白90試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬熱休克蛋白90試劑盒、豬熱休克蛋白90eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

注意事項：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。