人尿道上皮細(xì)胞【HumanUreter:NormalLliacArteryEndothelialCells】
產(chǎn)品描述：人尿道上皮細(xì)胞分離自正常人尿道管組織，正常人尿道上皮細(xì)胞主要功能：（1）尿道上皮細(xì)胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細(xì)胞組成。（2）上皮細(xì)胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸，它們具有多種防御機(jī)制來阻止病原體粘著，保持泌尿器溶解物的不滲透性。（3）膀胱上皮細(xì)胞表達(dá)雌激素α、β受體，上皮生長因子受體和纖維母細(xì)胞生長因子受體，在損傷和感染時(shí)，這些受體對(duì)膀胱上皮細(xì)胞起著重要作用。（4）能釋放許多細(xì)胞因子、免疫系統(tǒng)介質(zhì)。公司提供的人尿道上皮細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人尿道上皮細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanUreterPrimaCell:NormalLliacArteryEndothelialCellsCatNo.3-0330)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人尿道上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到人尿道上皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHOUTP;5‘-三1酸尿苷三鈉UTP, Tri Salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SCARB2 Others Human 人 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸Fmoc-Lys(Mtt)-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芴甲氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸Fmoc-Thr(Bzl)-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N'-Fmoc-L-賴氨酸Fmoc-Lys-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠尿道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLFmoc-天門冬氨酸-β-芐酯Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester質(zhì)量規(guī)格：>98%
F9 小鼠畸胎瘤細(xì)胞脫氫諾龍醋酸酯Dehydronandrolon質(zhì)量規(guī)格：>96%

ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 延胡索酸/富馬酸/ 反丁1二酸Fumaric acid質(zhì)量規(guī)格：AR,99%

小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]甲磺酸達(dá)氟沙星Danofloxacin mesylate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲磺酸達(dá)氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Danofloxacin mesylate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CM-M053小鼠卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL海藻酸鈣Calcium Alginate質(zhì)量規(guī)格：AR,99%
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元 Rattus瓊脂糖凝膠6FF1克2～8℃

EPHA7 Others Mouse 小鼠 EPHA7 / EHK-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 順-十輕-1-酚 CIS-DqCcxy7no-1-NcPHTHOL 99 36129-47-4

人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS1,2,3,4-環(huán)丁四羧二酐 Cyclobutcnq-1,2,3,4-tqtrcccrboxylic dicnhydridq 4412-87-6

GREM1 Others Mouse 小鼠 Gremlin 1 / GREM1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 麥芽浸膏湯shēng huà shì jì容量：100克

CL-0445Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2ConcanavalinA 25mg/100mg Amresco分裝
人尿道上皮細(xì)胞SERPINB2 Others Human 人 SerpinB2 / PAI-2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 0.5ml薄壁管5毫克

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-2041,2-二氫-2-異丁氧... Isobutyl 1,2-dihydro-2-isobutoxy-1-qui... 38428-14-7 5G 通用試劑

MDA-MB-435S細(xì)胞，癌細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞,HNE3細(xì)胞 CL-0292MKN45(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2言醋-L-谷安醋 L-(+)-Glutcmic ccid xy7nochloridq 138-12-8

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A本，英文名或英文縮寫：Iodobenzene，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：

SIGIRR Others Mouse 小鼠 SIGIRR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 14525-44-1N-(γ-L-谷酰)-1-胺(+4°C)L-GLUTAMIC ACID GAMMA-(BETA-NAPHTHYLAMIDE)
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。