操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

人輸尿管上皮細(xì)胞【HumanUreteral:NormalUreteralEpithelialCells】
產(chǎn)品描述：人輸尿管上皮細(xì)胞分離自正常人輸尿管組織內(nèi)皮，人輸尿管上皮細(xì)胞主要功能：（1）輸尿管連接腎與膀胱。（2）上皮細(xì)胞形成完整包膜屏障，輸送尿液至膀胱儲(chǔ)存，防止尿液滲入。公司提供的人輸尿管上皮細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人輸尿管上皮細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanUreteralPrimaCell:NormalUreteralEpithelialCellsCatNo.3-0337)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人輸尿管上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 骨髓瘤細(xì)胞，P3X63Ag8.653細(xì)胞 RN-c細(xì)胞，大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞殺螟丹(標(biāo)準(zhǔn)品)Aramite質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)Aramite solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=3%

LIFR Others Mouse 小鼠 LIFR / CD118 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Amberlite?IRA402 強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂(氯型)Amberlite? IRA402質(zhì)量規(guī)格：氯型

腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)Amberlite? XAD1180N質(zhì)量規(guī)格：粒徑0.350 - 0.600 mm

CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 嘧菌酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Azoxystrobin質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
MuM-2B細(xì)胞，人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide

趨化因子3-O-甲基 4-羥基雌二醇3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol

LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 17α-雌二醇-16,16,17-d317α-Estradiol-16,16,17-d3

小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2炔雌醇-2,4,16,16-d4Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4

人膀胱平滑肌細(xì)胞(HBdSMC)( 5×105 )炔雌醇3-硫酸鹽Ethynyl Estradiol 3-Sulfate
CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二十七烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃500毫克

兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE)無水錄化(II) CHROMIUM(II) CHLORIDq 10049-02-2

QG-56細(xì)胞，人肺扁平上皮癌細(xì)胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細(xì)胞亞株,CHO-K1細(xì)胞 CM-M010小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL聚乙二醇 12000 Poly(ethylene glycol) 12,000 (PEG 12000) 25322-68-3 500G 通用試劑

Saos-2(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2赤霉素GA4+7shēng huà shì jì容量：RT5克

Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 setDicamba 1g/5g Sigma 523844
人輸尿管上皮細(xì)胞T-112B胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL纖粘連蛋白shēng huà shì jì容量：RT1克

CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-溴-2-典嘧啶 5-Bromo-2-iodopyrimidinq 183438-4-6

上皮細(xì)胞生長添加物EpiCGS維生素A棕櫚酸酯shēng huà shì jì容量：10克

Hs 578T細(xì)胞，人成纖維細(xì)胞 人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞系,293 Ad5+細(xì)胞 胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)戊二酸5克

雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1(番紅O)
注意事項(xiàng)：
1. 接收到人輸尿管上皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。