操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞【MouseBone:NormalArticularChondrocytes】
產(chǎn)品描述：小鼠軟骨細(xì)胞分離自正常小鼠軟骨組織，軟骨細(xì)胞主要功能：（1）軟骨是人身體中唯一不會發(fā)生癌變的組織。（2）骨骼在發(fā)育初期大部分是由軟骨構(gòu)成的。（3）軟骨一般起到承重負(fù)荷，減少關(guān)節(jié)間骨骼摩擦等作用。公司提供的小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，均來自新鮮組織。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseBonePrimaCell:NormalArticularChondrocytesCatNo.3-4022)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
胃黏膜上皮Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)羥乙基磺酸鈉SHES質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

Jurkat細(xì)胞，急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞 正常小鼠Leydig細(xì)胞,TM4細(xì)胞 胰酶中和液TNS羥乙基醋酸鉀PHES質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21-(三氟乙酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%)1-(Trifluoroacetyl)imidazole質(zhì)量規(guī)格：用于GC衍生化,≥98.5%

BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M116小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC2,3-二溴丙酰胺(98%)2,3-Dibromopropionamide質(zhì)量規(guī)格：0.98

非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6滑石粉(800目)Talc質(zhì)量規(guī)格：800目
CL-0347HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2滅菌唑(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.2%) Triticonazole質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.2%

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞，MCF7細(xì)胞 PT67(小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞)速滅威標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)Tsumacide solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%

人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;C918嗪氨靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Triforin質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

OSMR Others Human 人 OSMR / IL31RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三唑1(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC))Triazophos質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC)

人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT蟲(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)Tebufenozide質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
RH-35細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞 HeLa(細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1036戊基奈，英文名或英文縮寫：Oxyvanadium phthaloyenine，級別：試劑級，98%，二水物，規(guī)格：500毫克

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)氧化鉍;三氧化二鉍 BisMuth trioxidq;BisMuth yqllow;BisMuthous oxidq 1304-76-3

SK-MES-1(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 偶氮二異二，英文名或英文縮寫：AIBME，級別：BR，90%，規(guī)格：5克

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]隨機(jī)引物100毫克2～8℃

FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PH緩沖液 PH8.0(20℃)NA
小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H083人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μgSP6RNAPolymeraseSP6核糖核酸聚合酶500毫升BR,150u/mg，粉末，微生物

CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1-錄;己基錄;錄正 1-Chlorohqxcnq 244-10-2

KEAP1 Others Human 人 KEAP1 / INRF2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) FMOC-D-本酸shēng huà shì jì容量：RT1克

大鼠質(zhì)神經(jīng)元RN-snRibavirin1-β-D-呋核糖基-1H-1,2,4,-三氮唑-3-羧酰胺100克BR，97%

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2 膀胱癌細(xì)胞，RT4細(xì)胞 U-2 OS(骨肉瘤細(xì)胞)10177-29-44-錄煙酸4-Chloronicotinic acid
注意事項：
1. 接收到小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。