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小鼠氣管和支氣管上皮細胞
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公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
參數規(guī)格:
小鼠氣管和支氣管上皮細胞【MouseAirway:NormalBronchialandTrachealEpithelialCells】
產品描述:呼吸道上皮細胞是由纖毛、無纖毛和能分泌黏液的細胞按照從近端到遠端呼吸道分布的混合細胞群組成。這類細胞的各個亞型細胞各具特點,從而不僅能形成物理屏障,可有效的防止多種有毒物質,而且通過產生和分泌大量化學介質和細胞因子形成高度復雜的宿主防御系統(tǒng)。支氣管上皮由表面的上皮細胞和粘液腺體組成。表面的上皮細胞由基細胞,杯狀細胞和纖毛細胞三種細胞構成,形成了基底柱狀結構,并能清除粘液纖毛。用支氣管上皮細胞培養(yǎng)分化誘導纖毛表型的研究顯示,IL-4和IL-13的刺激能改變增殖、纖毛運動、黏液分泌等一系列細胞功能。支氣管上皮細胞增殖以及其它細胞過程也部分受到EGF受體信號的調節(jié)。支氣管上皮細胞的培養(yǎng)為我們研究這類細胞的功能和病理生理機制提供了一個體外模型。公司提供的小鼠氣管和支氣管上皮細胞,均來自新鮮組織。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產品小鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseAirwayPrimaCell:NormalBronchialandTrachealEpithelialCellsCatNo.3-4064)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,小鼠氣管和支氣管上皮細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
產品名稱 | 小鼠氣管和支氣管上皮細胞 |
英文名稱 | MouseAirway:NormalBronchialandTrachealEpithelialCells |
貨號 | GOY-Y6377 |
凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
收到小鼠氣管和支氣管上皮細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)天青II曙紅質量規(guī)格:BSAzure II eosinate
AL7P/HL-60R細胞,人原髓細胞白血病細胞 615小鼠T細胞性白血病瘤株,L7712細胞 孔雀綠1酸鹽檢測試劑盒MGmP菲律賓菌素;非律平;Filipin質量規(guī)格:sigma分裝Filipin complex from Streptomyces filipinensis
NCI-H520(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2天青I;天青B質量規(guī)格:BSAzure I
C4-2(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]天青II質量規(guī)格:BSAzure II
白鰱尾鰭細胞系;SCF天青A質量規(guī)格:BSAzure A chloride
胎兒表皮角化細胞完全培養(yǎng)基 100mL卡拉膠Carrageenan質量規(guī)格:粘度≥0.005 pa.s
MDCK細胞,狗腎細胞 AAV-293( 胚腎細胞) 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5普侖司特Pranlukast質量規(guī)格:≥98%,BR
EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (Fc 標簽)1酸美托洛爾Metoprolol tartrate質量規(guī)格:>99%,BR
WI-38(人胚肺細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠癌細胞;CCC-Ca761-031酸美托洛爾(標準品)Metoprolol tartrate質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
人少突膠質前體細胞-懸浮生長裂解物HOPC-os L阿拉伯膠Arabic gum質量規(guī)格:>99%,醫(yī)藥級
6T-CEM (人T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2AGAROSEBLENDERS-TBEBLEND1.5%瓊脂糖 - TBE 混合物 1.5%生物技術級白色粉末RTsigma
ANPEP Others Mouse 小鼠 ANPEP / APN / CD13 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-拂本酰錄 3-Fluorobqnzoyl chloridq
人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1CALCIUMxy7noXIDE氫氧化鈣美國藥典級白色至米白色粉末RTsigma
LY86 Others Human 人 LY86 / MD-16 人細胞裂解液 (陽性對照) 本酸脫羧酶培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT10克
人臍血間質干細胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells814-68-6酰錄(含穩(wěn)定劑甲氧基氫醌)Acrylyl chloride
小鼠氣管和支氣管上皮細胞CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細胞裂解液 (陽性對照) AMPD1,1-二(羥甲基)1克AR,99%
CL-0459U14(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2香豆速;1,2-本并同;1,2-本并哌哢;氧雜鄰同;香豆內酯;本并鄰氧芑同 CouMcrin;1,2-Bqnzopyronq;5,6-Bqnzo-2-pyronq;cis-o-CouMcrinic ccid lcctonq;CouMcrinic cnhydridq;Tonkc bqcn ccMphor; 91-64-2
CN3 Others Mouse 小鼠 Coactin 3 / CN3 人細胞裂解液 (陽性對照) Strontiumcaonate菱鍶礦1公斤AR,99%
大鼠晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLACRYL-GLIDE玻璃板硅化處理試劑生物技術級透明無色液體RTsigma
EB (NBL-4)牛胚氣管細胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS139-59-34-基二本4-pxenoxyaniline