操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【MouseCoronary：NormalCoronaryArteryEndothelialCells】
產(chǎn)品描述：小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自正常小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞，呈單層扁平分布。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最少的微血管。公司提供的小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞，采用膠原酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MousecoronaryPrimaCell:NormalcoronaryarteryendothelialcellsCatNo.3-4204)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞傳3-5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人胎盤絨膜癌細(xì)胞;BeWo氫氯噻嗪雜質(zhì)CHydrochlorothiazide Impurity C

HCC-9724細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞,P815細(xì)胞 牛腎細(xì)胞;MDBK-d6Prednisolone-d6

MDCK(犬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×29-甲基-d3-腺嘌呤9-Methyl-d3 Adenine

Promocell C-23010 Fibroblast Growth Medium , 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500mlβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸, 縮減環(huán)已基銨鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt

牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1β-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸,縮減二鉀鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced dipotassium salt
人胚胎，皮膚，肌肉;M-20四螨嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Clofentezine質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%

PA317細(xì)胞，鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,DMS153細(xì)胞 CL-0396NCI-H226(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)Clofentezine solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系;pDSr a2-mpl-X四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)Clofentezine solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%

ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Carboxine質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%

穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E環(huán)(Standard for GC,>99.0%(GC))Cyclohexanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.0%(GC)
LEPR Others Human 人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ETHANOL,70%70%乙醇生物技術(shù)級(jí)無(wú)色無(wú)混濁液體RT不sigma

人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞裂解物HCPEpiCL3-基-2-本噻坐啉腙言醋鹽 3-MqTHYL-2-BqNZOTHIcZOLINONq HYDRcZONq xy7noCHLORIDq 1490-12-1

RK1 Others Canine 狗 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) SAPONIN皂苷試劑級(jí)米白色至棕黃色粉末RTsigma

人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M IE8CobaltChlorideHexahydrate錄化鈷六水ACS級(jí)粉紅色結(jié)晶RTsigma

FL62891細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 小鼠白血病克隆細(xì)胞系,L6565細(xì)胞 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1629-11-81,6-己二醇;1,6-二羥基;六亞甲基二醇;六亞甲基甘醇1,6-Hexanediol;Hexametxylene glycol;Hexane-1,6-diol
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞HHpC Pellet 人肝細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人口腔角質(zhì)細(xì)胞總RNAHOK NAGENEPAGE6%*CLDPAK*6% GENE-PAGE 19:1, 7 M 尿素生物技術(shù)級(jí)100MLCOLD

T-101B胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液)10mL三拂磺醋鋇 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7

IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / CD130 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ACRYL/BISSOLUTION酰胺/甲叉溶液500MLCOLD

腦膜細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MenCGS鹽酸強(qiáng)力霉素shēng huà shì jì容量：25克

大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2 7721肝癌細(xì)胞，7721細(xì)胞 HuT78(T細(xì)胞白血病細(xì)胞)(植物凝集素P)
注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。