細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠心肌細胞（乳鼠）【MouseCardiac:NormalMyocardialCells】
產(chǎn)品描述：心肌細胞構成心壁的主要成分。為心臟博動的物質基礎。心肌細胞根據(jù)其生理功能可分為兩類,即工作性心肌細胞和傳導性心肌細胞。其中工作性心肌細胞構成心房肌和心室肌,是心壁的主要組成部分,具有興奮、傳導和收縮的功能;而自律性心肌細胞組成心臟的傳導系統(tǒng),包括竇房結、結間束、房室交界、左右束支和普肯耶纖維網(wǎng)。它們除有興奮、傳導的功能外,還有自律性,即不受神經(jīng)支配與體液的影響,有產(chǎn)生周期性興奮的能力。竇房結興奮,將沖動擴布到心肌,引起心肌的收縮,從而產(chǎn)生心肌細胞的生物電現(xiàn)象。所以心肌細胞具有興奮性、自律性、傳導性和收縮性四種生理特性。公司提供的小鼠心肌細胞（乳鼠），采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠心肌細胞（乳鼠）培養(yǎng)試劑盒(MouseCardiacPrimaCell:NormalMyocardialCellsCatNo.3-4211)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，小鼠心肌細胞（乳鼠）可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
注意事項：
1. 接收到小鼠心肌細胞（乳鼠），肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人胎盤絨毛膜細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-氧基奧氮平Olanzapine N-Oxide

MA-891細胞，小鼠癌高轉移細胞 L929(成纖維細胞) 人葡萄膜色素細胞;UM氨曲南Aztreonam質量規(guī)格：> 95%,BR

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)氨曲南（標準品）Aztreonam質量規(guī)格：HPLC>95%,標準品

RH-35(大鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 巴卡丁 IIIBaccatin III質量規(guī)格：度> 98%,BR，可用于細胞培養(yǎng)

人肺轉化細胞;AE1201巴卡丁 III（標準品）Baccatin III質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0920鹽酸洛美沙星Lomefloxacin HCl質量規(guī)格：>98.5%,BR

293FT細胞，表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞 大鼠肝細胞瘤,H4-II-E-C3細胞 CL-0324BT-20(人癌細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸洛美沙星（標準品）Lomefloxacin HCl質量規(guī)格：含量測定

BC-009(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2氯替潑諾Loteprednol Etabonate質量規(guī)格：>99.0%

HTEpC-c 人類氣管上皮細胞(HTEpC) 500,000cells 人腦血管平滑肌細胞HBVSMC氯替潑諾(標準品)Loteprednol Etabonate質量規(guī)格：HPLC>99.0%,標準品

原代內皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml洛伐他汀Lovastatin,Monacolin K質量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照) X-SA瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT1把/包

MEG-01 人成巨核細胞白血病細胞偶氮錄膦mN;2-(4-錄-2-膦醋基本偶氮)-7-(3-肖基本偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋 Chlorophosphonczo MN 77320-04-0

MSTO-211H人肺癌細胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS (50%) Glutaraldehyde solution (Grade I, 50% ...  10ML 通用試劑

MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標簽)L-天門冬酸鉀shēng huà shì jì容量：RT25克

人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] 人支氣管成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL(二硫代蘇糖醇)
小鼠心肌細胞（乳鼠）DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-Malicacid蘋果酸1毫克CP，99%

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2固綠 FCF brillicnt bluq G 323-42-9

IL4 Others Mouse 小鼠 IL4 / Ierleukin-4 (Q136D,Y139D) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羅丹明 B Rhodamine B (Dye content, ≥95%) 81-88-9 25G 染色劑

心肌細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)Cyclooctane環(huán)辛酮25克BR，97%

獼猴肌肉細胞;MMm7 人結腸癌細胞，HT-29細胞 Bcap-37(癌細胞)(蛋酸))