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成年小鼠心肌細胞
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成年小鼠心肌細胞【MouseCardiac:NormalMyocardialCells】
產品描述:心肌細胞構成心壁的主要成分。為心臟博動的物質基礎。心肌細胞根據其生理功能可分為兩類,即工作性心肌細胞和傳導性心肌細胞。其中工作性心肌細胞構成心房肌和心室肌,是心壁的主要組成部分,具有興奮、傳導和收縮的功能;而自律性心肌細胞組成心臟的傳導系統(tǒng),包括竇房結、結間束、房室交界、左右束支和普肯耶纖維網。它們除有興奮、傳導的功能外,還有自律性,即不受神經支配與體液的影響,有產生周期性興奮的能力。竇房結興奮,將沖動擴布到心肌,引起心肌的收縮,從而產生心肌細胞的生物電現象。所以心肌細胞具有興奮性、自律性、傳導性和收縮性四種生理特性。公司提供的小鼠心肌細胞(乳鼠),采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產品成年小鼠心肌細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseCardiacPrimaCell:NormalMyocardialCellsCatNo.3-4247)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,成年小鼠心肌細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
成年小鼠心肌細胞 | MouseCardiac:NormalMyocardialCells | GOY-Y6403 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到成年小鼠心肌細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產品:
人絨癌細胞;JEG-34-叔丁基杯[4]芳烴-O,O',O'',O'''-四乙酸四乙酯(>96.0%(HPLC))Tetraethyl 4-tert-Butylcalix[4]arene-O,O',O'',O'''-tetraacetate質量規(guī)格:>96.0%(HPLC)
PPIB Others Human 人 PPIB / CYPB 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-叔丁基硫雜杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylthiacalix[4]arene質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
家貓肺細胞;FCA-L14-對乙酰氨基酚硫酸鉀鹽4-Acetaminophen Sulfate Potassium Salt
SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-對乙酰氨基酚硫酸鹽-d34-Acetaminophen-d3 Sulfate
CL-0101Hela(人細胞)5×106cells/瓶×23-(N-乙酰-L-半胱氨酸-S-基)對乙酰氨基酚鈉鹽3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen Salt
人葡萄膜色素細胞;UM四甲基錫(>96.0%(GC))Tetramethyltin質量規(guī)格:>96.0%(GC)
THPO Others Cynomolgus 食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 人細胞裂解液 (陽性對照) 二氯二茂鋯(>97.0%(T))Zirconocene Dichloride質量規(guī)格:>97.0%(T)
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Chirabite-AR[用于核磁共振]Chirabite-AR質量規(guī)格:用于核磁共振
DMP1 Others Human 人 DMP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(>98%(T))Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III) 質量規(guī)格:>98%(T)
NRK-52E 大鼠腎細胞三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(>95%(T))Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III)質量規(guī)格:>95%(T)
腎系膜細胞培養(yǎng)基MCM-prf4-(三氟甲基)煙酰胺4-(Trifluoromethyl)nicotinamide
CDC42BPB Others Human 人 CDC42BPB 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1-甲基-煙酰胺化物1-Methyl-nicotinamide Iodide
人正常前列腺基質永生化細胞;WPMY-1煙酰胺-2,4,5,6-d4Nicotinamide-2,4,5,6-d4
P388D1細胞,瘤細胞 人結腸腺癌細胞,HCT-8細胞 CM-H020人胰島β細胞完全培養(yǎng)基100mLN-(羥甲基)煙酰胺N-(Hydroxymethyl)nicotinamide
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6β-萘酚,異萘酚質量規(guī)格:AR2-Naphthol
成年小鼠心肌細胞DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照) ChloramineTtrihydrate錄亞明T100毫克超,99%
人羊膜細胞;HA單炳同-D-葡萄糖 1,2-O-Isopropylidqnq-D-glucofurcnosq 18249-40-1
SW-13細胞,人腎上腺皮質腺癌細胞 豬細胞系(ST),ST細胞 CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞)5×106cells/瓶×2言醋摸西沙星 Moxifloxccin xy7nochloridq 18686-86-8
D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×25-肌苷二嶙酸三鈉鹽50克RT
hMo-PB-c single donor 人類外周血細胞來源的單核細胞, 10 million 人心臟成纖維細胞-心室HCF-av(Bis-Acrylamide雙酰胺)
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
