操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞【MouseUterus：NormalEndometrialEpithelialCells】
產(chǎn)品描述：（1）子宮內(nèi)膜亦稱子宮粘膜，是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層。（2）子宮內(nèi)膜對動情素和孕激素都起反應(yīng)，因此可隨著性周期（發(fā)情周期、月經(jīng)周期）發(fā)生顯著的變化。公司提供的小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞，采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseUterusPrimaCell:NormalEndometrialEpithelialCellsCatNo.3-4358)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人胚肺細(xì)胞系;KuMA全反式甲酯視黃酸all-trans Retinoic Acid Methyl Ester

EL4細(xì)胞，瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,SW480細(xì)胞 CM-H045人肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL13-順式-甲酯視黃酸13-cis Retinoic Acid Methyl Ester

Walker氏癌肉瘤256瘤株;W2566-FAM ；6-羧基熒光素6-Carboxyfluorescein質(zhì)量規(guī)格：0.95

VLDLR Others Human 人 VLDLR / VLDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-FAM ；5-羧基熒光素5-Carboxyfluorescein質(zhì)量規(guī)格：>95%

孔雀綠1酸鹽檢測試劑盒MGmP色素(水溶)Nigrosine water soluble質(zhì)量規(guī)格：BS
CL-0125J82(人膀胱癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2替米沙坦酰基-β-D-葡萄糖苷酸Telmisartan Acyl-β-D-glucuronide

P3X63-Ag8.653細(xì)胞，鼠骨髓瘤細(xì)胞 人Butt`s瘤細(xì)胞,NAMALWA細(xì)胞 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076-d4Isoniazid-d4

AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2噻托溴銨-d3Tiotropium-d3 Bromide

CX3CL1 Others Human 人 CX3CL1 / N 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去乙基鹽酸胺酮-d4Desethyl Amiodarone-d4 Hydrochloride

兔腎細(xì)胞;RK-13去乙基鹽酸胺酮Desethyl Amiodarone Hydrochloride
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1酸鈣，英文名或英文縮寫：Calcium iodate，級別：AR，99%，規(guī)格：5克

SUNE-1細(xì)胞，低分化鼻咽癌細(xì)胞系 鼠色素瘤細(xì)胞系,B16-Fo細(xì)胞 CM-H031人食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLε-己內(nèi)酯 6-Hqxcnolcctonq 20-44-3

NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2葛根素，英文名或英文縮寫：Puerarin，級別：BR，粘度50 mpe.s，規(guī)格：10克

Promocell C-26140 Placeal Epithelial CellGrowth Medium KIT, 胎盤上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml曲酸shēng huà shì jì容量：100克

腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)PonceauS 10g/100g原裝 Amresco 0860
小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞NCI-H2227(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)S-腺苷高半胱酸水解酶100克

RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元3-磺酸 3-Pyridinesulfonic acid,≥98.0% 636-73-7 5G 通用試劑

RPS6KA6 Others Human 人 RSK4 / RPS6KA6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 木質(zhì)速磺醋鈣鹽 LIGNOSULFONIC cCID, CcLCIUM ScLT 8061/2/7

人成纖維細(xì)胞;HFF5-尿苷一嶙酸二鈉鹽5克

SPA-A1細(xì)胞，肺腺癌細(xì)胞 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞,NCI-H1975細(xì)胞 CL-0452T/G HA-VSMC(人血管平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2木糖賴酸脫氧膽酸瓊脂XLD AGAR
注意事項：
1. 接收到小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。