上海谷研實業(yè)有限公司
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小鼠甲狀腺上皮細胞
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公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
參數(shù)規(guī)格:
小鼠甲狀腺上皮細胞【MouseThyroid:NormalThyroidEpithelialCells】
產品描述:甲狀腺上皮細胞(也稱為濾泡細胞或主要細胞)是在甲狀腺細胞是負責生產和分泌甲狀腺激素,甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原氨酸(T3)。公司提供的小鼠甲狀腺上皮細胞,采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產品小鼠甲狀腺上皮細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseThyroidPrimaCell:NormalThyroidEpithelialCellsCatNo.3-4386)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,小鼠甲狀腺上皮細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
產品名稱 | 小鼠甲狀腺上皮細胞 |
英文名稱 | MouseThyroid:NormalThyroidEpithelialCells |
貨號 | GOY-Y6420 |
凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
收到小鼠甲狀腺上皮細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
人胚肺二倍體細胞;HL橙皮苷(標準品)Hesperidin質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 橙皮苷Hesperidin質量規(guī)格:HPLC≥90%,BR
人間充質干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA橙皮素(標準品)Hesperitin質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 蟲草素(標準品)Cordycepin質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
家貓肺細胞;FCA-L1川陳皮素;蜜橘黃素Nobiletin質量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
人急性T細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1異魯米諾(>98.0%(HPLC)(T))Isoluminol質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
IL18R1 Others Mouse 小鼠 IL18R1 / CD218a 人細胞裂解液 (陽性對照) 草酸雙[2,4,5-三氯-6-(戊氧羰基)苯基]酯(>98.0%(HPLC))Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl] Oxalate質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二鈉鹽水合物(>99.0%(HPLC)(T))Di 8-Amino-1,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate質量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)
ROBO2 Others Human 人 ROBO2 人細胞裂解液 (陽性對照) 102(>97.0%(HPLC)(N))Coumarin 102質量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N)
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml) 314(>98.0%(HPLC)(N))Coumarin 314質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)
人骨骼肌成肌細胞cDNAHSkMM cDNA1,4-α-D-葡聚糖麥芽水解酶,英文名或英文縮寫:β-Amylase,級別:BR,4000u/g,規(guī)格:5克
GPNMB Others Human 人 GPNMB / HGFIN 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,4’-二安基二本迷 3,4'-Oxydicnilinq 627-87-6
3T3?L1 小鼠脂肪細胞N-DODECYL-β-D-MALTOSIDEN-十二烷基-β-D-麥芽糖苷高級白色粉末FROZENsigma
CL-0246YAC-1(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2肝嶙脂鈉鹽,英文名或英文縮寫:Heparin wo7ium salt,級別:BR,1500-3000u/mg,規(guī)格:1克
rCF, 大鼠心臟成纖維細胞10318-18-0DL-半胱酸鹽酸鹽;DL-2-基-3-酸鹽酸鹽DL-Cysteine xy7nochloride
小鼠甲狀腺上皮細胞AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B2/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2.0ml離心管shēng huà shì jì容量:1KU
CL-0241VCaP(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×21-氧基2-炳醇 1-Mqthoxy-2-propcnol 107-98-
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內皮細胞系 昆蟲卵巢細胞,SF9細胞 NK-92(人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞)蠶蛹蛋白胨shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克
人導管癌細胞;ZR-75-30Zincphosphatemonobasic嶙酸二氫鋅100克AR,99%
CHIT1 Others Human 人 CHIT1 / Chitinase-1 人細胞裂解液 (陽性對照)