操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞【MouseBrain:NormalNerveAstrocytes】
產(chǎn)品描述：小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細(xì)胞。神經(jīng)膠質(zhì)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中產(chǎn)生。當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞。膠質(zhì)細(xì)胞能在II類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性Ｔ細(xì)胞時表達(dá)抗原，能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。公司提供的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)均來自正常小鼠腦組織，采用胰酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseBrainPrimaCell:NormalNerveAstrocytesCatNo.3-4463)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞傳10代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse6-芐氧基華法林6-Benzyloxy Warfarin

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A奧美沙坦酸Olmesartan Acid

人骨骼肌細(xì)胞 (HSkMC)( 5×105 )10-姜酚（標(biāo)準(zhǔn)品）10-Gingerol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0243WI-38(人胚肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×26-姜酚（標(biāo)準(zhǔn)品）6-gingerol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30 大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL8-姜酚（標(biāo)準(zhǔn)品）8-Gingerol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼泊金乙酯Ethyl Paraben

人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-HDMEC四環(huán)素1酸復(fù)鹽Tetracycline phosphate complex

TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四環(huán)素Tetracycline質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分

犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR4-鹽酸差向四環(huán)素4-Epitetracycline hydrochloride

95-D細(xì)胞，人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)血小板基因倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO-pt細(xì)胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠癌細(xì)胞;SHZ-889-芴甲基-N-琥珀酰亞基碳酸酯，英文名或英文縮寫：FMOC-OSU，級別：BR，99%，規(guī)格：10克

BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) α-L-巖藻糖苷酶 α-L-Fucosidase (1.8u/mg) 9037-65-4 1U 通用試劑

人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF NA加醋-D FORMIC cCID C-D 917-71-2

ATF2 Others Human 人 ATF2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Chloroauricacidhydrated四水合錄金酸5毫克基準(zhǔn)試劑，99.95%

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17(L-絲酸)
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞小鼠軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL哌拉西林鈉25克

P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8.653 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS2,6-二錄本醋 2,6-Dichlorophqnylccqtic ccid 6272-4-

IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白5--2-脫氧尿苷250毫克RT

USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HAVSMC, 人主動脈平滑肌細(xì)胞奈酚AS-TR乙酸酯100毫克保存：-20℃

CM-R089大鼠皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1072-97-52-基-5-溴2-Amino-5-bromopyridine
注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。