操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。產(chǎn)品僅供科研使用
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

大鼠膀胱上皮細(xì)胞【RatBladder：NormalBladderEpithelialCells】
產(chǎn)品描述：膀胱上皮細(xì)胞來自于膀胱組織，其主要作用有：(1)組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分。(2)在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子。(3)受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞，進(jìn)而影響腎臟病變。公司提供的大鼠膀胱上皮細(xì)胞，采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatBladderPrimaCell:NormalBladderEpithelialCellsCatNo.3-7225)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠膀胱上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅供科研使用
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞cDNAHSkMSC cDNA苯甲酰烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Benzoylhypacoitine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯甲酰烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Benzoylaconine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HT-29人結(jié)腸癌細(xì)胞 HT-29 human colon cancer cells McCoy's 5a+10%FBS姆沙伯 108 CHROMOSORB(R) 108 8902/8/6

TNFSF12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)1,4-雙(5-苯基-2-惡... 1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene (... 1806-34-4 5G 通用試劑

人虹狀體上皮細(xì)胞 (HIPEpiC)( 5×105 ) HUM, 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞 Human氫氧化100克

人T瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77(+)Glucose
大鼠膀胱上皮細(xì)胞NCI-295R細(xì)胞，人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞TCM15,S180細(xì)胞 CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2DL-Isocitricacidtriwo7iumsaltDL-異檸檬酸鈉100克BR，95%

WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22′-脫氧鳥苷 -15N2,99% 961-07-9 250MG 通用試劑

HCASMC-c 人冠狀動脈平滑肌細(xì)胞(HCASMC) 500,000cells 小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)己二晴;二晴;1,4-二青基丁烷 Hqxcnqdinitnilq;1,4-Dicycnobutcnq;TqtrcMqthylqnq dicycnidq;cdipic dinitnilq

肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)KANAMYCINSULFATE卡那霉素美國藥典級白色至米白色精細(xì)粉末RTsigma

CST9L Others Human 人 CST9L / Testatin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 對磺酰-L-精酸鹽酸鹽Na-p-Tosyl-L-argineine metxyl estar xy7nochloride
注意事項(xiàng)：
1. 接收到大鼠膀胱上皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。