人子宮頸上皮細(xì)胞提取物
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人子宮頸上皮細(xì)胞提取物

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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 人子宮頸上皮細(xì)胞提取物
英文名稱 Human Cervix : Normal Cervical Epithelial Cell Derivatives
貨號 GOY-Y6599
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

參數(shù)規(guī)格:
人子宮頸上皮細(xì)胞提取物Human Cervix : Normal Cervical Epithelial Cell Derivatives
產(chǎn)品描述:人子宮頸上皮細(xì)胞提取物是從人子宮頸上皮細(xì)胞提取的,人子宮頸上皮細(xì)胞從正常人子宮頸組織制備。正常人子宮頸組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。            潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。產(chǎn)品僅供科研使用

產(chǎn)品名稱

人子宮頸上皮細(xì)胞提取物

英文名稱

Human Cervix : Normal Cervical Epithelial Cell Derivatives

貨號

GOY-Y6599


凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

收到人子宮頸上皮細(xì)胞提取物如何處理?產(chǎn)品僅供科研使用
1
、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。

B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)1,4-二氨基蒽醌(>90%,BS)1,4-Diaminoanthraquinone質(zhì)量規(guī)格:>90%,BS

CD1d1 Others Mouse 小鼠 CD1D / R3G1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二羥基蒽醌(>96%,BR)1,4-Dihydroxyanthraquinone質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-761,3-二氨基胍鹽酸鹽 1,3-Diaminoguanidine Monohydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%

KDR Others Human VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,5--L-甲狀腺素,3,5-二甲腺原氨酸3,5-diiodo-L-thyronine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

CL-0201S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2短葉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Pinobanksin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)木栓酮(標(biāo)準(zhǔn)品)FRIEDELIN質(zhì)量規(guī)格:鑒別

人男性正常細(xì)胞;Hs68 人結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL表木栓醇(標(biāo)準(zhǔn)品)FRIEDELAN-3BETA-OL質(zhì)量規(guī)格:鑒別

人真皮成纖維細(xì)胞-裂解物HDF-a L老龍皮酸;網(wǎng)脊衣酸 A(標(biāo)準(zhǔn)品)(4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid質(zhì)量規(guī)格:鑒別用

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 焦性沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pyrogallol質(zhì)量規(guī)格:含量測定

人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]正十九烷(標(biāo)準(zhǔn)品) N-NONADECANE 質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標(biāo)
人永生化細(xì)胞;CNLMG-B5538LC 人肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLTributylphosphite亞嶙酸正丁酯100BR,97%

人絨毛間葉成纖維細(xì)胞RNAHVMF miRNA5 μg本同;基本基同;酰本 ccqtophqnonq;Mqthyl phqnyl kqtonq;BqnzoylMqthcnq;Hypnonq;Phqnylqthcnonq;ccqtylbqnzqnq 98-86-

SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分離試劑

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7Span40司班401公斤BR

CW-2細(xì)胞,結(jié)腸腺癌細(xì)胞 皮膚T細(xì)胞瘤,Hut-78細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63GlycogenTypeIII 100mg/500mg/1g原裝 Sigma G8876
人子宮頸上皮細(xì)胞提取物CLEC7A Others Human CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Z-Asn-OHN-芐氧羰基-L-天冬酰胺250毫克BR,98%

大鼠肝星形細(xì)胞RHSteC1-己流醇;1-;流代 1-Hqxcnqthiol;Hqxyl Mqrccptcn;n-Hqxcnqthiol;Mqrccptcn C6;priM-n-Hqxyl Mqrccptcn

NCI-H596[H596]細(xì)胞,人肺癌細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞,SK-RC-42細(xì)胞 人肝星形細(xì)胞HHSteCTaqplusshēng huà shì jì容量:1公斤

小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2Thiourea500BR,99%

NCR3 Others Human NKp30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 367-86-24--3-硝基三扶4-Fluoro-3-nitnobenzotrifluoride

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