

上海谷研實業(yè)有限公司
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小鼠表皮黑色素細胞提取物
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上海市松江區(qū)
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。產(chǎn)品僅供科研使用
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
小鼠表皮黑色素細胞提取物【Mouse Skin: Normal MelanocytesDerivatives】
產(chǎn)品描述:小鼠表皮黑色素細胞提取物是從小鼠原代表皮黑色素細胞提取的,小鼠原代表皮黑色素細胞從正常小鼠皮膚組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <1>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
小鼠表皮黑色素細胞提取物 | Mouse Skin: | GOY-Y6739 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:產(chǎn)品僅供科研使用
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
核桃誘導(DKWJuglans)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 萊苞迪甙A HPLC≥98% 20mg
核桃誘導(DKWJuglans)完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 萊苞迪甙A Rebaudioside A 質量規(guī)格:>98%,BR
赫特法病毒DNA化試劑盒10/20 來曲唑(標準品) Letrozole 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
黑色96孔板1塊 來曲唑 Letrozole 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
恒河猴主要組織相容性復合體(MHC/RhLA)ELISA檢測試劑盒Rhesusmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/RhLAELISAKit 96T/48T 來普霉素B 1%溶液 Leptomycin B 1% soluton 質量規(guī)格:>95%(HPLC),BC
烘培食物尿素比色法定量檢測試劑盒20 來那替尼 Neratinib(HKI-272) 質量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
烘賠食品乙酸比色法定量檢測試劑盒20 來那度胺/雷利度胺(標準品) Lenalidomide 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
烘賠食品乙酸激酶法定量檢測試劑盒20 來那度胺/雷利度胺 Lenalidomide 質量規(guī)格:>99.0%,BR
烘賠食物L-天門冬酰胺化學比色法定量檢測試劑盒20 來氟米特3-異構體 Leflunomide 3-Isomer
烘賠食物L-天門冬酰胺酶偶聯(lián)反應比色法定量檢測試劑盒20 來氟米特(標準品) Leflunomide 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品1,2,4-三羥蒽醌; 紅紫素; 紫素
Purpurin
分子式: C14H8O5
分子量: 256.21
CAS號: 81-54-9
檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98%
規(guī)格:20mg50mg100mg500mg1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
性狀: 本品為橙黃色結晶粉末
作用與用途:本品用于含量測定。
提取來源:
本品為茜草科植物茜草 Rubia cordifolia L.的干燥根及根莖。
藥理性質:
用法:色譜條件: 流動相:::0.2溶液(25:50:25);檢測波長為250nm(僅供參考)
貯藏方法: 2-8°C,避光保存。
小鼠表皮黑色素細胞提取物ANG-ⅠR人血管緊張素Ⅰ受體抗體規(guī)格:48T/96T 辣椒堿(合成) HPLC≥98% 20mg
Ang-Ⅰ人血管緊張素Ⅰ規(guī)格:48T/96T 和厚樸酚 HPLC≥98% 20mg
ANGⅡR-1人血管緊張素Ⅱ受體1規(guī)格:48T/96T 素 HPLC≥99% 1mg
ANG-Ⅱ人血管緊張素Ⅱ規(guī)格:48T/96T 荷葉堿 HPLC≥98% 20mg
angiostatin人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白規(guī)格:48T/96T 黑介子苷 HPLC≥98% 20mg
Angiotensinase人血管緊張肽酶規(guī)格:48T/96T 黑芥子硫苷酸鉀一水 HPLC≥98% 20mg
ANG-R-Tie1人血管生成素受體Tie1規(guī)格:48T/96T 紅花八角醇 HPLC≥98% 20mg
ANG-R-Tie2人血管生成素受體Tie2規(guī)格:48T/96T 紅景天苷 HPLC≥98% 20mg
ANG人血管生長素規(guī)格:48T/96T 紅景天素 HPLC≥98% 10mg
ANKRD1人心肌錨蛋白重復域1規(guī)格:48T/96T 紅景天素 HPLC≥98% 20mg
注意事項:
1. 接收到小鼠表皮黑色素細胞提取物,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
