細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes Derivatives】
產(chǎn)品描述：小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物是從小鼠原代成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取的，小鼠原代成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞從正常小鼠皮膚組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。        

cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。   

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。       

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克?。?span lang="EN-US"><2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
產(chǎn)品僅供科研使用5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
核固著液(ZENKER)50毫升 賴諾普利  Lisinopril Dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,二水合物可用于細(xì)胞培養(yǎng)

核抗原-FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒10 賴氨酸加壓素；賴氨加壓素  Lypressin Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)ELISA分析試劑盒48/96 賴氨匹林（標(biāo)準(zhǔn)品）  DL-Lysine Acetylsalicylate  質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定

核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20 錸標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml;溶劑：1.5mol/L硝酸)  Rhenium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml;溶劑：1.5mol/L硝酸

核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA分析試劑盒48/96 萊菔素 HPLC≥98% 20mg

核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20 萊苞迪甙D（標(biāo)準(zhǔn)品）  Rebaudioside D  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95.50%，標(biāo)準(zhǔn)品

核酸氧化8-氧鳥苷(8-oxo-G)ELISA分析試劑盒48/96 萊苞迪甙D HPLC≥98% 10mg

核酸氧化8-氧鳥苷(8-oxo-G)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20 萊苞迪甙C（標(biāo)準(zhǔn)品）  Rebaudioside C  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

核酸氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)ELISA分析試劑盒48/96 萊苞迪甙C HPLC≥98% 10mg

核酸氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20 萊苞迪甙A（標(biāo)準(zhǔn)品）  Rebaudioside A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)試劑盒 Rat Acyl-CoA desaturase 1,Scd1/Scd ELISA kit 鄰乙氧基(>98%,BR)  2-Ethoxybenzaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

英文名稱HumanCCL26ELISAKit人CCL26規(guī)格：96T/48T 鄰羥基苯乙酮(>99%,BR)  2-Hydroxyacetophenone  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

發(fā)酵液三醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20 2-異丙基咪唑(>98%,BR)  2-Isopropylimidazole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

ELISAKitLTBP2人組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白2規(guī)格：48T/96T 2-萘乙酸(植物激素級(jí))  2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級(jí)

小鼠黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA試劑盒 ，英文名： MAdCAM1 ELISA Kit 2-萘甲醛(>98%,BR)  2-Naphthaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA檢測(cè)試劑盒Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit 96T/48T 乙酸-2-萘酯(>98%,BR)  2-Naphthyl acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)試劑盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit 3,4,5-三甲氧基肉桂酸(>98%,BR)  3,4,5-Trimethoxycinnamic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

英文名稱HumanCCL24ELISAKit人CCL24規(guī)格：96T/48T 藜蘆醛(>99%,BR)  3,4-Dimethoxybenzaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

非哺乳動(dòng)物封阻緩沖液100毫升 3-羥基(>98%,BR)  3-Hydroxybenzaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

ELISAKitTPA人組織多肽抗原規(guī)格：48T/96T 間羥基肉桂酸(>98%,BR)  3-Hydroxycinnamic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

gypsogenin-3-O-β-D-gluco pyranoside

分子式： C37H56O10

分子量：660.85

CAS號(hào)： 96553-02-5

檢測(cè)方式：高校液相色譜法HPLC≥98%

規(guī)格：10mg20mg100mg500mg1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

性狀： 本品為白色粉末

作用與用途：本品用于含量測(cè)定。

提取來(lái)源：

本品為葫蘆科植物木鱉 Momordica cochinchinensis (Lour.) Spreng. 的干燥成熟種子。。

藥理性質(zhì)：

熔點(diǎn)142～143°

鑒別： (1)本品粉末黃灰色。厚壁細(xì)胞橢圓形或類圓形，邊緣波狀，直徑51～117μm，壁厚，木化，胞腔明顯，有的狹窄。子葉薄壁細(xì)胞多角形，內(nèi)含脂肪油塊及糊粉粒；脂肪油塊類圓形，直徑27～73μm，表面可見(jiàn)網(wǎng)狀紋理。

（2）照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取[含量測(cè)定]項(xiàng)下的供試品溶液及對(duì)照品溶液各5μl ， 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯--水（8:2:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

用法：

檢測(cè)條件：-0.4%（70：30）為流動(dòng)相 ；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm（僅供參考）

貯藏方法：

2-8°C，避光保存。
小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物RatProgesteronereceptor,PROGR大鼠孕同受體(PROGR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 拉坦前列腺素  Latanoprost  質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%

規(guī)格：HPLC含量測(cè)定