肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物
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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物
英文名稱 Human Lung MatchPair: Normal Pulmonary Epithelial Cell Derivatives
貨號 GOY-Y6837
規(guī)格 詳見說明書
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參數(shù)規(guī)格:
肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物Human Lung MatchPair: Normal Pulmonary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives
產(chǎn)品描述:人肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物是從人原代肺上皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中提取的,人原代肺上皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分別從正常人肺組織和腫瘤組織中制備。正常人肺組織和腫瘤組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。            潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。產(chǎn)品僅供科研使用

產(chǎn)品名稱

肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物

英文名稱

Human Lung MatchPair: Normal Pulmonary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives

貨號

GOY-Y6837


凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點(diǎn)及說明
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

收到肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物如何處理?產(chǎn)品僅供科研使用
1
、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。

大鼠腺苷受體A2a(ADORA2A)試劑盒 Rat Adenosine receptor A2a,ADORA2A ELISA kit 鋁試劑  Aluminon  質(zhì)量規(guī)格:ACS

大鼠腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)試劑盒 Rat adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA Kit 鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3  Aluminum solution  質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3

大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T 鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:5%HCl  Aluminum solution  質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:5%HCl

大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)試劑盒 Rat pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit 落葉松樹脂醇 HPLC98% 5mg

大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA檢測試劑盒Ratcardiacoponin,cTn-ELISAKit 96T/48T 落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Astilbin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)試劑盒 Rat Cardiac oponin ,cTn- ELISA kit 落新婦苷 HPLC98% 20mg

大鼠心肌肌鈣蛋白C(TnC)試劑盒 Rat Cardiac oponin C,cTn-C ELISA kit 駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品)  Harmaline;Dihydroharmine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)試劑盒 Rat Cardiac oponin T,cTn-T ELISA kit 駱駝蓬堿 HPLC98% 5mg

大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 Rat cardiac isoform of opnin T,c ELISA Kit 絡(luò)緦(標(biāo)準(zhǔn)品)  Rosin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測試劑盒Ratcardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T 絡(luò)緦 HPLC98% 10mg
大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)試劑盒 Rat Fatty acyl-CoA syhetase,ACS ELISA Kit 土拉霉素A,托拉菌素A,泰拉霉素  Tulathromycin A  質(zhì)量規(guī)格:>95%

英文名稱HumanS100ELISAKitS100ELISAKit規(guī)格:96T/48T 土拉霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tulathromycin A  質(zhì)量規(guī)格:效價測定

動物組織肌質(zhì)網(wǎng)橫小管(TTube)分離試劑盒10 拉氧頭孢鈉  Latamoxef   質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,日本進(jìn)口分裝

swinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/SLAELISA試劑盒豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/SLA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T   Procyanidin  質(zhì)量規(guī)格:>95%,葡萄籽提取物

小鼠鞘0(SPH)ELISA試劑盒 ,英文名: SPH ELISA Kit 原(標(biāo)準(zhǔn)品)  Procyanidin  質(zhì)量規(guī)格:UV>95%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

豬腸三葉因子(ITF)ELISA檢測試劑盒PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 96T/48T 胡椒堿  Piperine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR

大鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 Rat adiponectin,ADP ELISA Kit 胡椒堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Piperine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

英文名稱HumansubstancePreceptorELISAKitP物質(zhì)受體(SP-R)規(guī)格:96T/48T 紐莫康定B0(肺囊康定)   Pneumocandin B0  質(zhì)量規(guī)格:>95%

動物組織肌質(zhì)網(wǎng)三聯(lián)體(IAD)分離試劑盒10 福莫特羅   Formoterol    質(zhì)量規(guī)格:>98%

swinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/SLAELISA試劑盒豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC/SLA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲后馬托品  Homatropine Methyl Bromide   質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)口原裝
肺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit 紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Astragaline  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 ,英文名: ssDNA ELISA Kit 培利替尼;貝利替尼;EKB569  Pelitinib (EKB-569)  質(zhì)量規(guī)格:>98%,不可逆EGFR抑制劑

小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 ,英文名: ANA ELISA Kit 雷公藤乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tripdiolide  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 番瀉苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sennoside C  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA檢測試劑盒MouseAi-glucoprotein210,GP210 96T/48T 番瀉苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sennoside D  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

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