凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。產(chǎn)品僅供科研使用

參數(shù)規(guī)格：
人體腦膜組織提取物【Brain: Normal Human Brain Meninges  Derivatives】
產(chǎn)品描述：顱骨與腦間有三層膜。由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜；三層膜合稱腦膜。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體腦膜組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

實驗要點及說明 ：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。產(chǎn)品僅供科研使用
大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA檢測試劑盒RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit 96T/48T 木蘭花堿  Magnoflorine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit 木聚糖酶  Xylanase from Trichoderma viride   質(zhì)量規(guī)格：BR,6萬U/G

大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA檢測試劑盒RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit 96T/48T 木聚糖  XYLAN  質(zhì)量規(guī)格：>95%,來源于玉米芯,溶于水

大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit 木蝴蝶苷B（標準品）  Oroxin B  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

大鼠可溶性白介素-2 受體(sIL-2R)試劑盒 Rat soluble ierleukin-2 receptor,sIL-2R ELISA Kit 木蝴蝶苷B HPLC≥98% 20mg

大鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA檢測試劑盒RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 96T/48T 木蝴蝶苷A HPLC≥98% 20mg

RatHistamine,HISELISAKit大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 奧利司他  Orlistat(synthesis)  質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,BR

BMMY培養(yǎng)基100/500毫升 利福霉素鈉；利福霉素SV鈉  Rifamycin  salt  質(zhì)量規(guī)格：>900IU/mg ,BR

MouseIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 醋酸奧曲肽  Octreotide acetate  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

小鼠神經(jīng)型合成酶(nNOS/NOS1)ELISA試劑盒 ，英文名： nNOS/NOS1 ELISA Kit S(+)-2-氨基-1-丁醇  (S)-(+)-2-Amino-1-butanol   質(zhì)量規(guī)格：>99%,液態(tài),0.944 g/mL ,25℃

小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAkit 96T/48T D-鞘氨醇  trans-D-erythro-sphingosine  質(zhì)量規(guī)格：度≥98%
人體腦膜組織提取物小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒 ，英文名： Alox5 ELISA Kit 牡荊素(標準品)  Vitexin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠踝蛋白(TLN)ELISA試劑盒 ，英文名： TLN ELISA Kit 牡荊素葡萄糖苷(標準品)  Glucosyl-vitexin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒MouseTumornecrosisfactorα,TNF-α 96T/48T 牡荊素鼠李糖苷（標準品）  vitexin-2″-o-rhamnoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit 木蝴蝶苷B（標準品）  Oroxin B  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 ，英文名： TNF-α ELISA Kit 磷霉素氨丁三醇  Fosfomycin tromethamine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA檢測試劑盒MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-β 96T/48T 磷霉素氨丁三醇(標準品)  Fosfomycin tromethamine  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 ，英文名： TNF-β ELISA Kit 木犀草苷(標準品)  Cynaroside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-Ⅰ 96T/48T 木香烴內(nèi)酯(標準品)  Costundide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFsR-Ⅰ ELISA Kit 擬人參皂苷F11(標準品)  Pseudoginsenoside F11  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-Ⅱ 96T/48T 擬人參皂苷RT5(標準品)  Pseudoginsenoside RT5  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
收到人體腦膜組織提取物如何處理？
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。            潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學；<6>芯片研究與表達圖譜。