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主營(yíng)產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開(kāi)發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀(jì)), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營(yíng)), 化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備, 測(cè)量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
小鼠甲狀腺組織提取物
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≥1
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細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
小鼠甲狀腺組織提取物 | Thyroid: | GOY-Y6936 |
小鼠甲狀腺組織提取物【Thyroid: Normal Mouse Thyroid Derivatives】
產(chǎn)品描述:小鼠甲狀腺位于頸部甲狀軟骨下方,氣管兩旁。甲狀腺的主要功能是合成甲狀腺激素,調(diào)節(jié)機(jī)體代謝。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍小鼠甲狀腺組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜
注意事項(xiàng):
1. 接收到小鼠甲狀腺組織提取物,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
產(chǎn)品僅供科研使用5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
大量腺病毒樹(shù)脂法高級(jí)化試劑盒1 帕珠沙星 Pazufloxacin
大量真菌/酵母細(xì)胞基因組DNA化試劑盒10 帕夏查耳酮 HPLC≥98% 10mg
大量植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒5(20克/) 帕潘立酮-d4 Paliperidone-d4
大量植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒5(20克/) 帕米二鈉鹽 Pamidronate, Di Salt
大量質(zhì)粒DNA氯化銫化試劑盒10 帕米二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Pamidronate Di 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大量總RNA氯化銫化試劑盒10 帕米二鈉 Pamidronate Di 質(zhì)量規(guī)格:>99%,五水合物
大麥β-淀粉酶活性DNS比色法定量檢測(cè)試劑盒20 帕羅西汀馬來(lái)酸鹽 Paroxetine maleate
大麥β-淀粉酶活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒20 帕拉米韋三水合物 Peramivir Trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大麥葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒5 帕克醇 HPLC≥95% 20mg
大米蛋白化學(xué)萃取試劑盒20(10克/) 帕比司他 Panobinostat (LBH589, NVP-LBH589) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,廣譜HDAC抑制劑
Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 納他霉素,匹馬霉素,那他霉素,游霉素 Natamycin,Pimaricin 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
小鼠死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK1 ELISA Kit 納他霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Natamycin,Pimaricin 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA檢測(cè)試劑盒Guineapigierleukin4,IL-4ELISAKit 96T/48T 硝苯地平 Nifedipine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,CP,AR
?;罨?/span>A(ACV-A)試劑盒 Bovine Activin A,ACV-A ELISA Kit 硝苯地平(標(biāo)準(zhǔn)品) Nifedipine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanGSH-PXELISAKit人谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)規(guī)格:96T/48T 尼莫地平 Nimodipine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
動(dòng)物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒(含抗體)10 尼莫地平(標(biāo)準(zhǔn)品) Nimodipine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硝唑尼特 Nitazoxanide 質(zhì)量規(guī)格:>99%
小鼠斯鈣素1(STC1)ELISA試劑盒 ,英文名: STC1 ELISA Kit 硝唑尼特(標(biāo)準(zhǔn)品) Nitazoxanide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcinelisteriolysinELISAKit 96T/48T 寡霉素A Oligomycin A 質(zhì)量規(guī)格:>95%,美國(guó)進(jìn)口原裝
牛黃體生成素(LH)試劑盒 Bovine leinizing hormone,LH ELISA kit 鹽酸奧洛他定 Olopatadine HCl 質(zhì)量規(guī)格:BR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),度大于99%
小鼠甲狀腺組織提取物大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratthrombospondin1,TSP-1 96T/48T 千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷 Oroxyloside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
品
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit TAE684 NVP-TAE684 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的ALK抑制劑