使用方法:

一、歐洲放線菌LAMP試劑盒50次稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

產(chǎn)品名稱：歐洲放線菌LAMP試劑盒50次

英文名稱：European lamp kit for Actinomycetes

產(chǎn)品貨號(hào)：GOY6338

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。 

下列是歐洲放線菌LAMP試劑盒50次的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
甘氨脫氧膽 97%β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

葡萄糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

胰素氯化物(人) ≥97.0% (HPLC)血紅素氧合酶2(HO2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

羥基萘酚藍(lán) IND,94%(HPLC)血紅素氧合酶2(HO2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

蘇木精 高純級(jí),>99%（HPLC)血紅素氧合酶2(HO2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

蘇木精 Biological stain分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于顯微鏡,>99.5%（HPLC)，indicator (pH 5.0-6.0)分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

N-羥基二胺-N，N′,N′-三 AR,99.0%蛋白激酶Bγ(PKBγ)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

二十六烷  分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)蛋白激酶Bγ(PKBγ)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

七氟 離子色譜專用級(jí)蛋白激酶Bγ(PKBγ)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

DL-高半胱氨 95%肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

5-羥基糠醛 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99%肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

1,2-十六烷二醇 95%肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

正庚烷 Standard for GC,>99.5%(GC)心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
歐洲放線菌LAMP試劑盒50次標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱：Ioversol

左旋酒石標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1g  英文名稱：Tartaric Acid

齊拉西相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:10mg  英文名稱：

群多普利標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:125mg  英文名稱：Trandolapril

重酒石膽標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱：Choline Bitartrate

雷米普利標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:125mg  英文名稱：Ramipril

基標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:2g  英文名稱：Methylpyrrolidone

二類殘留溶N基標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1.2ml×3ampules  英文名稱：

頭孢泊肟酯標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:350mg  英文名稱：Cefpodoxime Proxetil

富馬依美斯汀標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:100mg  英文名稱：Emedastine Difumarate

2,2’連基雙(3基并二噻啉6)二銨鹽  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:ABTSdiammoniumsalt  含量:超，98%

2,2′聯(lián)氨雙（3基并噻啉6）二鹽底物  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:ABTSsubstrateliquid  含量:AR，60%

2,2二基1苦味基肼自由基  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Diphenylphthalate  含量:BR，98%

2,2'二羥基聯(lián)基  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:2,2'Biphenol  含量:CP，98.5%

2,2環(huán)尿苷  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:2,2′OCyclouridine  含量:試級(jí)，80%

2,2偶二(2基基咪)  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:AIBA  含量:AR，97%

2,3,5三基四  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:RT  含量:生物技術(shù)級(jí)，85%

2,3,5三代  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:TIBA  含量:CP，99%

2,3二一肟  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Diacetylmonoxime  含量:AR，98%

2,3二羥基[R(R*,R*)]二二銨鹽  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Ammoniumtartrate  含量:CP，65% 
技術(shù)保護(hù)點(diǎn):

一種用于檢測(cè)螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對(duì)外引物和一對(duì)內(nèi)引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！