使用方法:

一、伯克氏菌通用LAMP試劑盒50次稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

產(chǎn)品名稱：伯克氏菌通用LAMP試劑盒50次

英文名稱：Universal lamp kit for Burkholderia

產(chǎn)品貨號：GOY6570

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。

設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 

下列是伯克氏菌通用LAMP試劑盒50次的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
2-(2-氰基)丙二二酯 98% 硒蛋白P1(SEPP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

2,6-二基苯 98%硒蛋白P1(SEPP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

3-氧羰基苯 97%載脂蛋白B(APOB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

4-氧羰基苯 97%組織蛋白酶S(CTSS)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

3-氧基苯 98%血紅素結(jié)合蛋白(HPX)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

2-基苯 98%補體成分4(C4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

3-氧羰基苯頻哪醇酯 97% 活性腸肽(VIP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

4-(基代)苯 98%內(nèi)皮抑素(ES)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

基 98%抑素(ANG)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

二酰酯 97%抑制素(MSTN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

5-醛基呋喃-2- 97%免疫球蛋白G2(IgG2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

4-氟-2-基苯 97%末端補體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

3-氟-4-醛基苯 98%破骨細(xì)胞關(guān)聯(lián)受體(OSCAR)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

2-氟-4-基苯 96%高遷移率族蛋白1(HMG1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

2-氟-5-三氟基苯 98%高遷移率族蛋白1(HMG1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
伯克氏菌通用LAMP試劑盒50次COLO320細(xì)胞L-Selectin細(xì)胞株96T進口/國產(chǎn)原裝、分裝進口、國產(chǎn)200mgCAS號：土貝母苷 96TELISA Kit for Mucin 4 (MUC4)進口/國產(chǎn)2-8℃，避光14216-03-696T氨肽酶O(AP-O)ELISA試盒HPLC≥98%異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2檢測試盒20mgL-Selectin7772-94-3高端化學(xué)試封閉蛋白6(CLDN6)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)進口/國產(chǎn)原裝、分裝進口、國產(chǎn)50mgCAS號：土大黃苷 96TELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG)進口/國產(chǎn)常溫，避光760961-03-396TAP-1復(fù)合體亞基mu-1(AP-1 complex subunit mu-1)ELISA試盒HPLC≥98%異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M檢測試盒20mgMac-2BP7772-94-3高端化學(xué)試肌動蛋白束蛋白3(FSCN3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)14216-03-696T氨肽酶O(AP-O)ELISA試盒 
技術(shù)保護點:

一種用于檢測螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對外引物和一對內(nèi)引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！