使用方法:

一、豬瘟RT-LAMP試劑盒50次稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產品兼容。

8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

產品名稱：豬瘟RT-LAMP試劑盒50次

英文名稱：Classical swine fever virus RT-LAMP Kit

產品貨號：GOY6644

產品規(guī)格：50次

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。

運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

PCR反應五要素：

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。

設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。 

下列是豬瘟RT-LAMP試劑盒50次的相關產品：
1-烷磺鈉 98%次黃嘌呤核糖基轉移酶1(HPRT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1-辛烷磺鈉 98%WNT因子1(WIF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

蘇丹Ⅰ AR腎足蛋白(NPHN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

蘇丹I  Dye content 98%CD200分子(CD200)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

司班60 色譜固定液干擾素α/β受體2(IFNα/βR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1-烷磺鈉 98%腺嘌呤核糖轉移酶(APRT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

蘇丹紅Ⅲ ≥96%(HPLC),chromatographic standard脫氧胞苷激酶(DCK)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

百里香酚藍 IND可溶性胸苷激酶1(TK1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

百里香酚藍 ACS reagent, 95 %/鉀離子交換ATP酶α肽(ATP4α)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

鄰聯(lián)苯胺 AR，98%衰老關鍵蛋白3(FBLN3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1,2,4-三氯苯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)胰脂肪酶(PL)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

百里香酚酞 AR核纖層蛋白A/C(LMNA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

百里香酚酞 indicator髓分化因子88(MyD88)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

百里香酚蘭鈉 AR法尼酯X受體(FXR)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1,1,1-三氯烷 包含0.05%C4H8O2穩(wěn)定,standard for GC,≥99.5%骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
豬瘟RT-LAMP試劑盒50次腎癌細胞，OS-RC-2細胞Yes Associated Protein 細胞株96T進口/國產原裝、分裝進口、國產200mgCAS號：酰環(huán)孢菌素A 48TELISA Kit for Fibulin 1 (FBLN1)進口/國產-20℃，避光113558-14-896T水通道蛋白9(AQP9)Polyclonal AntibodyHPLC≥90%胰島素降解酶檢測試盒20mgYAP9007-34-5高端化學試鈉/葡萄糖協(xié)同蛋白4(SGLT4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)進口/國產原裝、分裝進口、國產200mgCAS號：酰黃芪皂苷I 48TELISA Kit for NK6 Homeobox Protein 1 (NKX6-1)進口/國產-20℃，避光481-74-396T重組醛糖還原酶(AKR1B1)Polyclonal AntibodyHPLC≥98%胰島素檢測試盒20mgZBED39007-34-5高端化學試肌腱蛋白N(TNN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)113558-14-896T水通道蛋白9(AQP9)Polyclonal Antibody 
技術保護點:

一種用于檢測梅毒螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對外引物和一對內引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內引物和反向內引物。

特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于及其他非科研用途！