南京卡米洛生物工程有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 生物領(lǐng)域技術(shù), 醫(yī)療器械, 生物實(shí)驗(yàn)室耗材, 辦公用品銷(xiāo)售, 化工原料及產(chǎn)品
裸鼠白胞介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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裸鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人白介素10(IL-10)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人白介素10(IL-10)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
裸鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體50μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
裸鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
試劑盒組成
名稱(chēng) | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無(wú) |
標(biāo)準(zhǔn)品(100pg/ml) | 0.5mL | 0.5mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
檢測(cè)抗體-HRP | 6mL | 3mL | 無(wú) |
20×洗滌緩沖液 | 20mL | 20mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無(wú) |
底物B | 6mL | 3mL | 無(wú) |
終止液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無(wú) |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | 無(wú) |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無(wú) |
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裸鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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