武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測
江蘇原位雜交公司-天津原位雜交-北京原位雜交
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
根據(jù)異源單鏈核酸分子間因結(jié)構(gòu)互補發(fā)生共價鍵結(jié)合,能形成互補雜合雙鏈,而進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究的一種技術(shù)。雙鏈核酸分子加熱至80~100℃時,堿基對之間的氫鍵斷開,形成兩條單鏈,這一過程叫作核酸的變性作用或解鏈。變性的核酸分子慢慢冷卻,互補的堿基對之間又會重新形成雙鏈分子,這一過程叫作核酸的復(fù)性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的環(huán)境中也會變性,當(dāng)條件適合時又可復(fù)性。核酸分子雜交技術(shù)是基于核酸變性與復(fù)性的原理。
原位雜交試驗
收集斑馬魚的胚胎,在Holfretor水中培養(yǎng),到達(dá)所需要的發(fā)育時期時,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時后用50%甲6醇2%多聚甲醛溶液洗,然后換成甲9醇,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧6水處理,去除色素?;蛘呤褂帽斤畴逑∪芤号囵B(yǎng),可阻斷色素的形成)
多種探針標(biāo)記檢測系統(tǒng)
基于地高3辛、生物素和熒光標(biāo)記分子的標(biāo)記和檢測系統(tǒng)是常見的原位雜交檢測方法。
熒光標(biāo)記檢測常為直接探針標(biāo)記方法,如在dUTP/UTP/ddUTP上連接Fluorescein后進(jìn)行核酸標(biāo)記。由于標(biāo)記在核酸上的熒光分子必須經(jīng)受雜交和洗脫過程中的考驗,以及熒光分子易于衰減,其檢測靈敏度受到一定的影響。但對熒光分子的直接檢測呈現(xiàn)的背景較低。