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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測(cè)
思特進(jìn)-浙江植物組織原位雜交-植物組織原位雜交電話
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祺祴祹祹祶祲祵祻祲祸祸
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原位雜交技術(shù)可應(yīng)用于什么方面
1.細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位 可用于基因圖譜、基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究。
2.感6染組織中病毒DNA/RNA的檢測(cè)和定位,如EB病毒mRNA、人類乳3頭狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測(cè)。
3.癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測(cè)。
4.基因在染色體上的定位。
5.檢測(cè)染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。
6.分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳
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多種探針標(biāo)記檢測(cè)系統(tǒng)
基于地高3辛、生物素和熒光標(biāo)記分子的標(biāo)記和檢測(cè)系統(tǒng)是常見的原位雜交檢測(cè)方法。
熒光標(biāo)記檢測(cè)常為直接探針標(biāo)記方法,如在dUTP/UTP/ddUTP上連接Fluorescein后進(jìn)行核酸標(biāo)記。由于標(biāo)記在核酸上的熒光分子必須經(jīng)受雜交和洗脫過程中的考驗(yàn),以及熒光分子易于衰減,其檢測(cè)靈敏度受到一定的影響。但對(duì)熒光分子的直接檢測(cè)呈現(xiàn)的背景較低。
另一種多聚體促進(jìn)劑是聚丙0烯0酸,用其鈉鹽,濃度為2%~4%。與硫酸葡聚糖相比,其優(yōu)點(diǎn)是價(jià)格低廉,粘度低(MW=90 000)。小分子化學(xué)試劑酚和Guandine thiocyanate也能促進(jìn)雜交,它們可能是通過增加水的疏水性和降低雙鏈和單鏈DNA間的能量差異而發(fā)揮作用。酚作為雜交促進(jìn)劑,只能在低DNA濃度的液相雜交中觀察到,該方法曾被稱為酚乳化復(fù)性技術(shù),該法不能用于固相雜交,因酚可引起核酸與膜的非特異吸附作用,即使在液相雜交中的應(yīng)用也是有限的。而Guandine thiocyanate可通過降低雙鏈DNA的Tm值而起作用。此外,該分子還可以促進(jìn)RNA的雜交,有裂解細(xì)胞而抑制RNase的作用??傊蛩崞暇厶呛途垡叶家蚰苡糜诠滔嚯s交是目前zui常用的雜交促進(jìn)劑。
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